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- 2019-01-03 发布于四川
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- | 2002-02-19 颁布
- | 2002-05-01 实施
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GB/r18651-2002
前 言
过去认为无浆体((anaplasma)是原虫,现确定是一种立克次氏体,译名还有微粒抱子虫、无形体等,
根据生物学特征,“无浆体”最为确切,因此本标准中用此名。牛无浆体病是一种牛血液传播病。牛一旦
感染,即可成为终生带虫者,使养牛业造成很大经济损失。世界动物卫生组织仁WorldOrganizationfor
AnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE〕将本病列为B类传染病,本病也是我国
出人境动物检疫对象之一。
OIE推荐诊断牛无浆体病的方法中,卡片凝集检测具有微量、快速、灵敏度高和特异性好等优点,故
得到广泛应用。我国曾报道过用补体结合试验诊断牛无浆体病,但因部分血清有抗补体作用,而常被误
判,目前,国内尚无卡片凝集检测标准。
本标准以(ME推荐技术为依据,参考了澳大利亚和美国检测方法,抗原保存期为一年到三年,试验
温度范围为25C-28C,
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:农业部动物检疫所。
本标准主要起草人:吴鉴三、张肖正。
中华人 民共和 国国家标准
牛无浆体病快速凝集检测方法 cs/T18651-2002
Methodsoffastagglutinationtest
forbovineanaplasmosis
1 范围
本标准规定了牛无浆体病快速凝集检测方法
本标准适用于牛无浆体病的诊断。其他动物无浆体病的诊断亦可参照本方法。
2 试剂和器械
2.1 试剂
a)无浆体凝集抗原,4℃保存;
b)阴性协同血清(牛血清因子),一70℃一一80℃保存;
。)阳性对照血清,一20C保存;
d)阴性对照血清,一20℃保存。
以上试剂由制标单位提供。
2.2 器械
2.2.1 微量移液器:5kL,10AIL或5醉~25ut(连续可调)
2.2.2 微量移液器头若干个。
2.2.3 试验用板:取85mmX12.5mm洁净透明塑料平板,用油漆或油性记号笔划成4排X6个区位。
3 操作步骤
实验应在25C^-28℃环境下进行。
3.1被检血清按常规采集和分离,从采集到第一次检测前,要在室温放置38h-48h,然后冷藏或冻存
备用,长期低温保存会使阳性率下降。
3.2 取出凝集抗原、阴性协同血清、阳性和阴性对照血清以及被检血清,在250C-28℃下放置
15min一20min,
3.3 同时在平板第一排左起 1,2区位划上阳性(+)和阴性(一)符号,其余各区位依次编上被检血
清一号。
3.4 用微量移液器在编号区位内按号分别加阳性、阴性对照血清和待检血清10pL
3.5 在各区位加凝集抗原5可一,靠近血清,互不接触。
3.6 在各区位抗原旁加阴性协同血清10[A-,互不接触。
3.7用牙签将各区位的三种反应物摊成液面(约成人小指甲盖面积),混合均匀。做一份血清换用一根
牙签。
IB 用手轻轻晃动该平板,在4min-8m。内,当阳性对照血清开始出现凝集反应时,对着黑色背景
判读结果。
中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2002一02一19批准 2002一05一01实施
217
GB/T18651-2002
4 判定标准
4 1 阳性对照血清出现颗粒清晰的凝集现象。
4 2 . 阴性对照血清没有可辨认的任何凝集颗粒。
们 被检血清凡出现可辨认的凝集颗粒的凝集现象,均判为阳性反应。
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