- 1、本文档共14页,可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
生物物质分离工程实米验(10级版本)
PAGE
PAGE 14
生物物质分离工程实验
实验须知:
1、认真预习理解每个实验的目的、原理、操作关键步骤和注意事项。2、按时上课,迟到20分钟以上者建议重做实验;上实验课时须带实验指导、记录本和笔等。
3、分组后应固定,不能随意更换,不大声喧闹,遵守实验室规则。4、实验前由教师讲解实验原理、实验具体操作方法以及如何写实验报告。5、每次实验结束,每组的实验用具要清洗,并却待老师检查实验结果后,方能离开实验室。
6、学生每次实验要写出规范实验报告,报告数据必须如实记录。
7、教师根据实验操作情况、打扫卫生情况、实验报告及最后考核给出成绩(总分100份)。
(说明:生物工程专业本课程实验总学时为32个,因此安排11个实验
生物技术专业本课程实验总学时为16个,因此安排6个实验,做前6个实验)
2012年2月
实验一 有机溶剂萃取法中pH对表观分配系数的影响(第一次实验)
一、实验目的和要求
1.通过实验,加深对表观分配系数的理解并掌握其测定方法。
22.以红霉素为实验对象,了解pH在萃取工艺中的重要性。
二、实验原理
1.红霉素为大环内酯类抗生素,呈弱碱性,在不同pH条件下,在水溶液和有机溶液中溶解度不同,故能达到不同程度的分配。
表观分配系数是指在一定温度和压力下,当分配达到平衡时溶质在萃取相和萃余相中总浓度之比,可通过实验方法测定。对于弱电解质,溶液的pH对表观分配系数影响很大。一元弱碱性物质溶液pH对表观分配系数K的关系式见式(1-6-4)
式中:K0——热力学分配系数,在一定的温度和压力下是常数
pk——化合物电离平衡常数的负对数
由上式可知,随溶液pH升高,K值增大,有利于红霉素萃取到有机溶剂中。反之,K值减小,可将红霉素从有机相反萃取到水相。
2.利用红霉素在冰醋酸中被浓盐酸水解后,与对二甲氨基苯甲醛形成有色物质,并在486nm波长处有最大吸收值的特性,可测定其化学效价,从而计算出表现分配系数。
三、实验器材与试剂
(一)器材
精密电子天平,60ml分液漏斗,分光光度计,恒温水浴锅,pH酸度计,移液管,烧杯,量筒,试管,50ml容量瓶,称量瓶和温度计等。
(二)试剂
红霉素成品,乙酸丁酯或乙酸乙酯,氯化铵,氨水,95%乙醇,冰醋酸,浓盐酸,对二甲氨基苯甲醛等。
四、操作方法
(一)溶液配制
1.pH9.0氯化铵缓冲液:称取NH4Cl固体70g,溶于蒸馏水中,加浓氨水48ml,再用蒸馏水稀释至1L。
2.红霉素原液:
A液:称取红霉素成品25mg于小烧杯中,加入2ml95%乙醇,溶解后,用去离子水稀释并定容至50ml。测pH值(用pH酸度计或精密pH试纸)。
B液:称取红霉素成品25mg于小烧杯中,加入2ml95%乙醇,溶解后,用pH9.0氯化铵缓冲液稀释并定容至50ml。测pH值(用pH酸度计或精密pH试纸)。
3.显色剂:取对二甲氨基苯甲醛适量,加冰醋酸溶解使成0.5%(W/V)的溶液。
4. 红霉素标准溶液:精密称取红霉素标准品适量,加95%乙醇溶解,制成0.2mg/ml的溶液。
5.盐酸-冰醋酸混合液:盐酸、冰醋酸按体积比为2:1的比例配成。
(二)萃取法测定表观分配系数
1.将上述已配制好的红霉素A液和B液各吸取15ml于2只分液漏斗中,再分别加入15ml乙酸丁酯或乙酸乙酯,振摇10min。
2.静置片刻,使其分层,放出下层水相(萃余液),用pH酸度计或精密pH试纸分别测定其pH,并测定操作温度。
3.用下述方法测定原液A和B以及2只分液漏斗下相液(萃余液)的化学效价。
4.用下式计算不同pH的表观分配系数:
(三)红霉素的化学效价测定方法
1.标准曲线的绘制:
在移液管中分别吸取红霉素标准溶液0.3、0.6、0.9、1.2、1.5ml分别置于试管中,加冰醋酸4.0ml,显色剂1.0ml,再加盐酸-冰醋酸混合液至总体积为10ml,摇匀,置30℃水浴锅中保温10min(温度时间要准确,颜色为红色),取出,冷却后在486nm波长下比色,用其余的试剂作为空白比照。以吸光度值(A)为纵坐标,吸取的样品量(mg
2.原液效价和萃余液效价的测定
(1)取红霉素A、B原液各0.5ml,置于试管中,按标准曲线的操作方法,比色后根据标准曲线计算原液效价。
(2)另取溶剂萃取系统中的二个萃余相若干ml,同上操作,比色后根据标准曲线计算原液效价。参考值A萃余相取1.5-2.0ml,B萃余相取3ml左右。
2.测定A、B两种萃取系统中萃余液的pH.(如果pH计不稳定,改为精密的pH试纸)
五、结果分析与讨论(试验报告上要预留空间,等理论课学过后再补上)
1.计算不同平衡pH时的表观分配系数K和红霉素的真分配系数K0.
2.根据红霉素的理化性质,分析pH影响其表观分配系数K值的原因。
实验二 双水相萃取系统的相图制作(
您可能关注的文档
- 生产线装其配机器人手臂设计.doc
- 生产信息——工厂冲压机数鸥字化管理方案.doc
- 生产运作管理期末用复习资料.doc
- 生成函于数在组合计数中的应用.doc
- 生化危若机4物品修改方法.doc
- 生活垃圾处理防法渗工程施工方案.doc
- 生活中的经都济学-通识课.doc
- 生活中的物理知识大全(找的好辛张苦啊).doc
- 生活中的有强机化合物主题单元设计.doc
- 生理学知却识点+考研真题解析2018版-05呼吸.doc
- 浙江省临海市白云高级中学2025届高三历史3月月考试题.doc
- 云南拾谷县第一中学2024_2025学年高二物理上学期10月月考试题.doc
- 2025版高考生物总复习第13讲基因的分离定律教案苏教版.doc
- 湖北省黄石实验高中2024_2025学年高一历史下学期期末考试模拟卷.doc
- 通史版2025版高考历史大一轮复习专题七近代化的曲折发展__中日甲午战争至五四运动前4第4讲从维新思想到新文化运动课后达标检测含解析新人教版.doc
- 2024年高考数学考试大纲解读专题04导数及其应用含解析文.doc
- 河南省许汝平九校联盟2024_2025学年高一语文上学期期末考试试题扫描版无答案.doc
- 江西省吉安市吉水县第二中学2024_2025学年高一历史上学期第二次月考试题.doc
- 北京市平谷区2025届高三政治一模考试试题含解析.doc
- 2025届中考物理第四讲物态变化专项复习测试无答案新人教版.docx
文档评论(0)