微生物农药-苏云金杆菌.pptVIP

内 容 发展历史 形态特征及生理生化 生物活性物质 分类及命名 分离 菌种选育 菌种保藏 生态学和地理分布 生产 应用 一、发展历史 一、发展历史 1901：日本石渡发现家蚕猝倒病 1911：Berliner命名 1938：法 Sporeine 第一个商品制剂 1953：Hannay 伴孢晶体 1959：β-exotoxin 1970：HD-1 1977：Bti---医学 线虫、防病、抗癌 105年，农业—医学 中国发展史 1941： 蒲蛰龙 菜青虫 解放初 ：孟雨 法国 1955：曹骥 法国商品分离、Lab杀虫 1959 ：张履鸿(苏)刘崇乐(福州人)捷克-玉米螟 1961： 彭中允 (苏) 1965 武汉、长沙生产 1986- 攻关、火炬、技改、863、973 改革开放为生物工程发展提供了机遇！ 二、 形态特征及生理生化 1、形态特征 周鞭(无鞭)、G+、H抗原、O抗原 芽孢: 石碳酸复红、孔雀绿 芽晶: 芽孢高抗逆，菌株保存方式 晶体典型为菱形、也有圆形、方形、椭圆形、不规则形，1个（几个)毒素、无毒 France: Pasteur Institute Dr. de Barjac 2、生理生化: 要求不高。 碳 源: 淀粉、糊精、麦芽糖、葡萄糖 N 源: 牛肉膏、蛋白胨、酵母粉、花生饼粉、豆饼粉、鱼粉、玉米浆 无机盐: K2HPO4、MgSO4、CaCO3。主要元素有磷、硫、镁、钾、钠、钙，微量元素锰、锌、硅、铁，所需甚微，水杂质即可满足，多了有毒。 温 度: 10-40℃，28-32℃适。 pH：微碱性条件 氧: 好氧 紫外线 抗生素及化学物: 放线菌素D、氯霉素、红霉素。 乳化剂抑制 发酵工程的前提 四、 分类及命名 1、鉴定及分类 (1) 生理生化：碳源、氮源、酶、代谢物 (2) 酯酶电泳 (3) H抗原: 德语Hauch(扩散) 英、日、美、法4位专家建议 (1982)--H.de Barjac博士(法国) (4) PCR 分子生物学 1、基因鉴定（cry/chi/vip/aii/ihnA/cyt) 2、克隆、表达 3、构建工程菌（细胞工程、基因工程） 4、转基因植物  2、命名 采集地: 苏云金、肯尼亚、以色列、九州、 东北、云南、武汉、华中、山东等。 (2) 寄主虫名：蜡螟、玉米螟、松毛虫等。 (3) 分离者：Kurstak、Thompson、Morrison等。 (4) 病症：猝倒、亚毒、杀虫等。 五、分离 昆虫 土壤：大本营，土壤习居菌。 Martin和Travers：2年（72个），24菌种，85年。 叶片 苔藓 60000：菌株非凡重视程度 昆虫体(22%) 土壤(44%) 贮藏物（18%） 其他（16%） 六、菌种选育 高毒力 良好的发酵和生产性能 对原材料的要求 生产稳定性 退化 现有菌株 育种技术 七、菌种保藏 2004.2.15. 100多位世界微生物专家齐聚北京，在“21世纪微生物资源中心的使命”的国际学术研讨会上达成共识：建立全球共享的微生物资源中心是大势所趋。 微生物菌种保藏专门机构：59个国家 菌种保藏中心：495个，90万余株。美国的ATCC （综合最大， 12万株）。美国农业部的NRRL（最大农业微生物菌种中心，8万株）。中国农业微生物菌种保藏管理中心(ACCC) 仅3000多株。 1、原理和要求 总原则：代谢速度低，又不失活。 低温：液氮、冷冻 隔氧：石蜡油 干燥：砂土管 2. 方法 (1) 砂土管：简单，不易污染 (2) 冷冻干燥：美国农业部 Brownsville Lab (3) 滤纸条：法国Pasteur研究所 (4) 液体石蜡斜面法：日本九州大学 (5) 菌膜保藏法： 便于邮寄，使菌种 保藏微型化 3、机构 美国：Ecogen公司：9000株 农业部Brownsville Lab，HD-X系列 Ohio州立大学，大量突变株。 法国：巴斯德研究所（WHO昆虫病原细菌参考 中心）3500株