系统性免疫与粘膜免疫对小鼠IgA肾病模型效果比较(2013).pptVIP

* * 七、研究成果 （一）SASP-GFP重组蛋白的表达、纯化。 如上图所示，Western Blot验证70KD条带即为重组蛋白 （荧光标记抗体为抗SASP多克隆抗体）。 * * 七、研究成果 （二）尿蛋白检测 平均值 SD T-test 皮下注射 GFP 1705.759537 120.0781848 control SA0587-GFP 2143.012834 244.3957664 0.068548844 尾静脉注射 GFP 1689.903209 83control SA0587-GFP 1920.422103 216.0138305 0.261272559 * * 七、研究成果 （二）尿蛋白检测 如上图所示，金黄色葡萄球菌表面蛋白-GFP融合蛋白经皮下注射及尾静脉注射途径给药。数据结果示实验组小鼠尿蛋白水平明显高于对照组；皮下注射组小鼠与尾静脉注射组小鼠尿蛋白水平没有明显差异。 * * 七、研究成果 （三）模型小鼠肾脏切片及HE染色： A图所示，实验组小鼠肾脏切片可见明显充血改变。 B图示肾小球囊区炎性细胞浸润。 * * 七、研究成果 （四）模型小鼠肾脏切片荧光染色-共聚焦显微镜显影 如左图所示： A为IgG荧光阳性显色为红色 B为IgA阳性显色为绿色 C为DCPI显示细胞核为蓝色 D为A、B、C合成图片黄色区域为IgG-IgA复合物阳性 * * 八、研究结论 通过系统免疫组小鼠与粘膜免疫组小鼠的试验结果比较发现，各组均见不同程度的炎症、蛋白管型及肾小管上皮水肿等病变，各组小鼠的血清抗体水平、血尿蛋白尿水平及胃肠粘膜和肾脏的抗原沉积及免疫复合物沉积水平较对照组有显著性差异，另外金黄色葡萄球菌表面蛋白-GFP融合蛋白可以诱发小鼠发生IgA肾病，通过皮下注射和尾静脉免疫两种方法均可以导致小鼠蛋白尿的产生，小鼠肾脏HE染色表现典型的充血及炎症浸润性病理变化，利用共聚焦显微镜也观察到了在肾小球系膜区IgG-IgA共沉淀的免疫病理变化。因此，以金黄色葡萄球菌表面蛋白-GFP融合蛋白为抗原免疫小鼠可以得到稳定的IgA肾病模型。 * * 九、任务书指标完成情况 本研究按照任务合同书计划，基本完成所拟定的各项研究目标。得出的结果为：通过比较系统免疫组小鼠与粘膜免疫组小鼠的试验结果发现，皮下注射和尾静脉免疫两种方法均可以导致小鼠肾脏发生IgA肾病的典型病变，同时也验证金黄色葡萄球菌表面蛋白-GFP融合蛋白可以用作抗原免疫Balb/c小鼠，使小鼠产生IgA肾病模型。与国内外研究结论基本一致。 * * * * 十、项目取得的成效 通过对本课题项目的深入研究，提高了本学科专业技术人员的科学素养，也使研究人员对IgA肾病的发病机制有了更加全面的认识。从而可以站在更高的角度来思考学科的发展方向，激励了团队人员的创新意识以及继续学习的兴趣，从而提升了本学科的学科建设水平。 * * 十一、项目应用发展的设想 通过本实验的研究，我们初步探索了通过比较系统免疫组小鼠与粘膜免疫组小鼠的试验结果发现，皮下注射和尾静脉免疫两种方法均可以导致小鼠肾脏发生IgA肾病的典型病变，同时也验证金黄色葡萄球菌表面蛋白-GFP融合蛋白可以用作抗原免疫Balb/c小鼠，使小鼠产生IgA肾病模型。由于该融合蛋白造模效果稳定，因此我们设想可以将此方法建立的模型用于临床相关的进一步基础性研究。 * * 厚德载医 博学济世 厚德载医 博学济世 厚德载医 博学济世 厚德载医 博学济世 厚德载医 博学济世 厚德载医 博学济世 * * 芜湖市科技计划项目总结报告 《系统性免疫与粘膜免疫对小鼠IgA肾病模型的效果比较 》 课题立项号： [2013] 197 汇报人： 孬 一 凡 项目完成单位：芜湖市人民医院检验科 * * 课题名称：系统性免疫与粘膜免疫对小鼠IgA肾病模型的效果比较 课题立项号： [2013] 197 课题类别：医药卫生 课题承担单位：芜湖市第一人民医院检验科 课题负责人：崔 凡 * * 一、课题立项背景： IgA肾病(IgA nephropathy，IgAN )是一组以IgA或IgA为主的免疫复合物在肾小球系膜区沉积为主要特征、病因不明的免疫复合物肾小球肾炎，是世界范围内最常见的原发性肾小球疾病。 IgA肾病典型的病理表现为：肾小球系膜细胞的增生、细胞基质增多以及新月体的形成，特征性免疫病理表现为大量免疫复合物（主要由IgA、IgG类型抗体和补体C3组成）在系膜区的沉积。