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乙肝病毒检测 ——方法学评价 乙肝病毒结构 （一） 乙型肝炎病毒结构特点 HBsAg：是HBV感染的主要标志 HBsAb：保护性抗体 HBcAg：仅存于感染的肝细胞核内， 　　　　一般不存在于血循环中 HBcAb: 非保护性抗体，HBcAb-IgM 　　　　提示HBV处于复制状态 HBeAg：HBV复制及强感染性的指标 HBeAb：有一定的保护作用，预后良好 患者血清中存在三种基本形态 大球型颗粒，又称Dane颗粒；小球型颗粒；管型颗粒 小球型颗粒；管型颗粒 管型颗粒 乙型肝炎病毒的实验室诊断 （一）血清学检查 （二）生化学检查 （三）HBV DNA、基因型和变异检查 血清学检查 项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM 方法 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性) HBsAg – 感染的标志 Anti-HBs – 既往感染/接种疫苗 Anti-HBc IgM – 急性感染标志 Anti-HBc IgG – 既往或慢性感染 HBeAg – 急性病毒复制，有传染性 Anti-HBe –病毒不再复制 HBV-DNA – 急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应 HBV血清学标志物的临床意义 两对半的意义 — 乙型肝炎的诊断 — 判断传染性 — 判断预后 — 筛查献血员 — 流行病学调查 乙肝三系定性检查是用来判断是否感染乙肝或粗略估计病毒复制水平的初步检查，对患者病情程度的评估参考性不大，所以乙肝患者在做乙肝三系定性检查的时候，应结合肝功能检查、乙肝病毒DNA检查、B超检查等来判定病情的轻重， ELISA检测灵敏低的原因及局限 ELISA法受其自身敏感性和特异性的限制; HBV S和前C基因区出现位点突变导致HBsAg和HBeAg表达缺陷。 影响因素多,如加样时间,试剂平衡时间,样本溶血程度等等。特别是低浓度样本易导致假阴性结果,使弱阳性样本漏检。 急性感染的窗口期; HBsAg检测方法灵敏度不足;血清亚型的漏检等。 标本中病毒颗粒少; 血清学检测的局限性 HBV具有“检测窗口期 假阴性结果 无法检测突变株及抗体 乙肝病毒的定量检测 1、乙肝表面抗原（HBsAg）定量检测： 1）参考值：0-0.05IU/mL 2）临床意义： （1）可作为HBV携带者乙肝病毒复制的参考指标 （2）评价拉美呋定的治疗效果 （3）监测应用alpha-干扰素治疗病人的乙肝病毒复制 （4）确定肝移植病人免疫球蛋白的使用剂量 2.乙肝表面抗体（抗-HBs）定量测定： 是HBsAg刺激机体产生的特异性抗体，是一种保护性抗体，能中和HBV。 （1）抗-HBs含量在0-10mIU/ml，表示不具有保护性，需要注射乙肝疫苗（3针：0-1-6方案）。 （2）抗-HBs含量在10-100mIU/ml，表示具有保护性，但较弱，需要乙肝疫苗强化注射（1针）。 （3）抗-HBs含量大于100mIU/ml，表示具有很强的保护性，不需要注射乙肝疫苗。 3、乙肝病毒e抗原（HBeAg） HBeAg增高说明病毒复制，具有很强的传染性。 4、乙肝病毒e抗体（抗-HBe） 抗-HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱，但并非没有传染性。抗HBe不是保护性抗体 。 5、乙肝病毒核心抗体（抗-HBc） 抗-HBc：不是中和抗体，有IgG和IgM两种形式。IgM在早期出现，而IgG在恢复期出现，可持续多年或终身存在。 乙肝五项定量检测的优点 由于乙肝病毒容易发生变异，再加上乙肝定性检测方法的局限性，会出现假阴性结果，导致不能及时发现乙肝的感染，也就不能得到及时的治疗，对医护人员和其他患者也存在着被感染的威胁。 乙肝五项定量应用目前最先进的化学发光法检测，避免了假阴性和漏检的问题，而且准确，尤其对乙肝病人的疗效观察提供了依据，这是检验发展的趋势。 两对半定量检测极大地提高了检测的灵敏度，LiCa技术检测HBsAg灵敏度可达0．5ng/ml，而ELISA检测HBsAg达到2ng/ml时才会阳性。 急性乙肝早期定量能及早检出HBsAg，确证HBV感染，几乎能与PreSi同时检测，在病程观察中大大缩短了“窗口期”，而酶标检测在乙肝早期往往HBsAg呈阴性。 慢性乙肝一些患者由于机体常缺乏对HBV包膜蛋白的免疫应答，HBsAg表达较低，酶标检测可出现HBsAg和HBsAb均阴性的情况，而定量检测则可避免这些情况的出现，为正确判断病情提供依据。 灵敏度如病毒发生变异后，表达量较低，常规ELISA测不出抗原，而