《GBT14965-1994-食物中氨基酸的测定方法》.pdfVIP

GB/T 14965—1994 中华人民共和国国家标准 食物中氨基酸的测定方法 Method for determination of amino acids in foods GB/T 14965—1994 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定食物中氨基酸的方法。 本标准适用于食物中天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨 酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨 酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸的测定。其最低检出限为 10pmol。 本标准不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的氨基酸 测定。 2 原理 食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸，经氨基酸分析仪的离子交换柱分 离后，与茚三酮溶液产生颜色反应，再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。 3 试剂 全部试剂除注明外均为分析纯，实验用水为去离子水。 3．1 浓盐酸：优级纯。 3．2 6mol/L 盐酸：浓盐酸（3.1）与 1：1 混合而成。 3．3 苯酚：须重蒸馏。 3．4 混合氨基酸标准液（仪器制造公司出售）：0.002 50mol/L。 3．5 缓冲液 3．5．1 pH2.2 的柠檬酸钠缓冲液：称取 19.6g 柠檬酸钠 （Na C H O ·2H O ） 3 6 5 7 2 和 16.5mL 浓盐酸加水稀释到 1 000mL，用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 2.2。 3．5．2 pH3.3 的柠檬酸钠缓冲液：称取 19.6g 柠檬酸钠和 12mL 浓盐酸加水稀 释到 1 000mL，用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 3.3。 3．5．3 pH4.0 的柠檬酸纳缓冲液：称取 19.6g 柠檬酸钠和 9mL 浓盐酸加水稀 释到 1 000mL，用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节至 4.0。 3．5．4 pH6.4 的柠檬酸纳缓冲液：称取 19.6g 柠檬酸钠和 46.8g 氯化钠（优 级纯）279mL，加水稀释到 1 000mL，用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 6.4。 3．6 茚三酮溶液 O）168g，加入冰乙酸 3．6．1 pH5.2 的乙酸锂溶液：称取氢氧化锂 （LiOH·H 2 （优级纯）279mL，加水稀释至1 000mL，用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 5.2。 3．6．2 茚三酮溶液：取 150mL 二甲基亚砜 （C H OS ）的乙酸锂溶液 （3.6.1） 2 6 50mL 加入 4g 水合茚三酮（C H O ·H O ）和 0.12g 还原茚三酮（C H O ·2H O ） 9 4 3 2 18 10 6 2 搅拌至完全溶解。 3．7 高纯氮气：纯度 99.99%。 3．8 冷冻剂：市售食盐与冰按 1：3 混合。 中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 1994—03—181994—03—18 批准 199批准 1994—09—014—09—01 实施 实施 GB/T 14965—1994 4 仪器和设备 4．1 真空泵。 4．2 恒温干燥箱。 4．3 水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积 20～30mL。用