复习生物选修三第一章(实用).pptVIP

(2)培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入鱼抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体中含有__________________________，作为标记基因。 (3)研究人员通常采用农杆菌转化法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用______________________技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。 (4)利用组织培养技术将导入鱼抗冻蛋白基因的番茄组织细胞培育成植株。图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的__________________过程。 脱分化、再分化 抗氨苄青霉素基因(ampr) 抗原—抗体杂交 * 探究实验1：普通牛奶赖氨酸含量低，未来提高牛奶中赖氨酸的含量，吉林大学农学部利用现代生物工程技术，得到一头转入赖氨酸基因的克隆奶牛，预计将来其分泌的乳汁中含有更多的赖氨酸。 问题一：实验中通过什么生物工程可实现目的？ 其基本步骤有哪些？ 问题二：实验过程如何设计？ 用转基因动物生产药物---动物乳腺生物反应器 获取赖氨酸基因 构建基因表达载体 （在赖氨酸基因前加乳腺蛋白基因的启动子） 显微注射导入哺乳动物受精卵中 形成早期胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达） 1、获取目的基因的方法 2、基因表达载体如何构建？至少包括哪几部分？ 3、导入生物体内方法？ 4、如何检测该反应器是否设计成功？ 目的基因的获取 目的基因是指： ?基因文库中获取（基因组文库，cDNA文库） 目的基因转录的mRNA----单链DNA----双链DNA 反转录 酶 ?PCR技术扩增 条件： 过程： ?化学合成法（基因小、核酸序列已知） 主要是指编码蛋白质的基因。也可以是一些具有调控作用的因子 原理： 双链DNA复制 引物 模板DNA 四种脱氧核苷酸 热稳定DNA聚合酶 第一步：加热90～95℃ 氢键断裂，DNA解链； 第二步：冷却55～60℃，引物结合到互补DNA链； 第三步：加热70～75℃，DNA聚合酶从引物起合成互补链。 基因表达载体构建 1、基因表达载体由________、________ ________、______四部分组成。 目的基因 启动子 标记基因 终止子 2、启动子作用： 3、标记基因的作用： RNA聚合酶识别和结合的位点 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 筛选出含目的基因的细胞 导入植物 细胞： 将目的基因导入受体细胞 导入动物 细胞： 导入微生物细胞： 受体细胞 导入方法 体细胞 受精卵 受精卵 显微注射法 Ca2＋处理法 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 目的基因是否插入转基 因生物染色体的DNA： 目的基因的检测与鉴定 目的基因是否表达： 目的基因是否转录： 方法: DNA分子杂交 方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原抗体杂交 鉴定—— 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 检测— 动物膀胱生物反应器 与乳腺生物反应器相比其优点： 普通牛奶赖氨酸含量低，未来提高牛奶中 赖氨酸的含量，吉林大学农学部利用现代 生物工程技术，得到一头转入赖氨酸基因 的克隆奶牛，预计将来其分泌的乳汁中含 有更多的赖氨酸。 （1）获得外源赖氨酸基因所需要的工具酶 是 ，该基因不能从人体细胞中获得， 原因是 。 （2）右图是基因表达载体示意图，构建基因表达载体的目的 , 图中A片段表示 ，B片段表示 。其中，抗生素抗性基因的作用是 .。