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药品微生物检验特点及过程控制 中国药品生物制品检定所 药品微生物检验特点及过程控制 药品因素 环境影响 培养观察 抽样检查 破坏试验 无菌/微生物限度检查理念 微生物检查的过程控制 一、实验设施（硬件——物质保障） 二、检验程序（软件——有效的结果） 三、结果判断（调查——可靠的结论） 一、实验设施 实验室系统 操作环境 关键设备 对照培养基 （一）、实验室系统 洁净实验条件 有效性：整体10000级、局部100级。 安全性：保护样品、人员和环境。 可操作性：方便、快捷、顺畅。 洁净实验条件的维护、验证 阳性菌实验室达到P2生物安全标准 实验室改造示例：原布局图 拟定布局图  建议布局图1 建议布局图2实验室系统——中检所微生物实验室 （一）、实验室系统 环境菌库 洁净环境常见菌（浮游菌）： 头状葡萄球菌（Staphylococcus?capitis） 溶血葡萄球菌（Staphylococcus?haemolyticus） 缓症链球菌（Streptococcus?mitis） 科氏葡萄球菌（Staphylococcus?cohnii） 藤黄微球菌（Micrococcus?luteus） （二）、操作环境 1、隔离器 2、生物安全柜 3、超净工作台 （二）、操作环境 搽拭 （三）、关键设备 （四）、对照培养基 二、检验程序 二、检验程序 接受任务 实验方案 实验准备 样品核对 实验操作 过程监控 培养观察 实验室管理规范（软件） 中检所抗生素室微生物实验室质量管理体系 编写说明及批准页 1 实验室概况 1.1 实验室简介 1.2 实验室通讯资料 1.3 实验室认可项目/参数表 1.4 实验室平面图及功能区域 1.5 仪器设备总览 1.6 常备试剂耗材一览表 1.7 实验室发展目标 2 管理规范 2.1 安全管理 2.2 业务流程 2.3 人员管理（6个SOP） 2.4 样品管理（3个SOP） 3 标准操作规程 3.1 检验工作SOP（13个） 3.2 仪器操作SOP（30个） 3.3 实验记录SOP（9个） 4 实验室保障 4.1 实验室设施、设备及消耗品供应商确定原则 4.2 实验室设施服务商 4.3 实验设备供应商 4.4 实验室消耗品供应商 （一）、实验准备 实验准备应坚持“平战结合”，物质准备有备无患，应随时保证“来之能战” 。 尤其注意常备有效期要求的物品：培养基、冲洗液、滤器、小型实验器材等。 实验准备——无菌室专用酒精棉球制备实验准备——场地清洁实验准备——台面清洁 （二）、样品核对 尽快取得样品，确保样品传递过程中的完整性、安全性、有效性； 仔细核对样品及样品资料，高度关注媒体公布样品（问题样品），同时尽量获取非问题样品及同类样品，进行比较实验、比较分析； 样品外观检查、完整性检查。 样品外观检查——欣弗样品外观检查——刺五加样品外观检查——双黄连样品完整性真空检漏 （三）、实验操作 不断完善标准化操作规程（SOP），严格避免实验室污染。 实验操作——物料进场 （四）、实验过程监控 三、结果判断 长菌与否 分离鉴定 溯源调查 结果报告 三、结果判断 是不是微生物？ 是什么微生物？ 微生物来自哪里？ 几点思考 参见：《FTIR法用于药品检出菌与药品微生物检验洁净室环境菌的相似性考 察》《药学学报》，2007，42（11）：1189～1194 《判断无菌检查阳性结果有效性的实验探讨》《药物分析杂志》， 2008， 28（05）：66～71 1、长菌与否？ 浑不浑浊? 物理变化、化学变化还是生物变化？ 是不是微生物？ （1）、液体培养基浑浊 物理变化？化学变化？生物学变化？ （2）、平板上的菌落 琼脂表面、琼脂中、琼脂和平皿夹层 菌落or药渣？ 菌落or药渣？ 经60Coγ射线大剂量照射再检验 延长培养时间到7天 重新划线培养 镜检 2、分离鉴定 （1）立即转接2ml该培养物至相同的培养基中继续培养； （2）取5支冻存管，每管分装1ml浑浊培养物，-80℃保存； （3）取浑浊培养物在TSA平板/血琼脂上划线，分离污染微生物； （4）如果发现硫乙醇酸盐流体培养管变浑浊，还应增加血平板划线，并在厌氧条件下培养分离厌氧菌。由平板分离到的菌落应进一步鉴定，并逐一保藏。 是什么微生物？ 宏观：生