细胞生物学实验课程教案.docVIP

细 胞 生 物 学 实验课程教案（1） 实验题目 血涂片的制备及细胞大小的测量 实验学时 3 实验目的 掌握血涂片的制备方法 认识红细胞及各种白细胞的典型形态 3．掌握显微测微尺的使用方法 实验原理 　 将血液样品制成单层细胞的涂片标本，经瑞氏染液染色后，不同白细胞中的颗粒可以呈现不同的颜色。碱性粒细胞的颗粒呈蓝紫色，酸性粒细胞的颗粒呈橘红色，中性粒细胞的颗粒呈粉红色。根据细胞中颗粒的颜色、大小及多少，再结合细胞的大小及细胞核的形态，就可以将白细胞进行分类计数。 实验仪器 显微镜、粗天平、载玻片、滴管、离心管、离心机、医用一次性采血针、酒精棉球、镊子、载玻片、目镜测微尺和镜台测微尺等 实验材料 鸡血细胞 实验内容与实施过程 备 注 1.血涂片的制备与血细胞的观察（50分钟）: 采血前用70％酒精棉球消毒人的指腹→采血→推片：挤出第二滴血置于载玻片的右侧→再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状→两玻片的角度以30~45°为宜，轻轻将双凹片向前匀速推进，即涂成血液薄膜→染色：用天平称取去皮的土豆块茎2g+10mlPBS缓冲液，浸泡2h→粗提液中含有可溶性土豆凝集素。 2. 显微测微尺的使用（35分钟）：以无菌方法抽取鸡血注射器中抽取3.8%柠檬酸钠1ml抽取鸡静脉血液2ml，用生理盐水洗5次，每次2000r/min，离心5min，最后按压积红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞液。 3.细胞的观察与讨论（50分钟）：淋巴细胞、白细胞、中性粒细胞、碱性粒细胞和酸性粒细胞 4、实验小结（15分钟）：总结实验过程中学生的操作是否规范；实验是否成功，如果不成功，问题出在哪里；哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容，提问。共150分钟。 实验作业 1.绘制各种不同类型的血细胞,并说明它们的主要作用？ 2.任选20个红细胞，测量其直径，并计算出平均值. 。 参考资料 （含参考文献、期刊、杂志等） 实验总结 对于涂片的厚度一定要掌握，不然太厚不方便观察细胞，对于各种白细胞的染色一定要把握好，适度的染色可容易的区分开五种白细胞，并进行大小的测量和绘图。 细 胞 生 物 学 实验课程教案（2） 实验题目 细胞化学实验 实验学时 3 实验目的 熟悉细胞脂类的显示技术，了解其在细胞中的分布；学习区别定位细胞DNA、RNA的显示方法 实验原理 　 （1）苏木精为碱性染料染细胞核，苏丹红为偶氮脂溶性染料，可显示细胞中的脂类的分布及量； （2）甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸根基团结合力强，结合后阻止派洛宁从碱基之间插入。甲基绿与DNA的结合产物为绿色。派洛宁与RNA的结合力强，RNA结构较松散，派洛宁可以插入，从而中和磷酸基团，阻止甲基绿染色，派洛宁与RNA的结合物呈红色，根据颜色的部位可以判断DNA和RNA的定位并且判断两种核酸的相对含量。 实验仪器 水浴锅、冰冻切片机、载玻片等； 实验材料 猪肝、花生子叶 实验内容与实施过程 备 注 脂类显示（65分钟）：用猪肝切片和花生的超薄切片，学习掌握使用冰冻切片机的操作技术，获得理想的切片； 细胞中DNA和RNA的显示（70分钟）：材料选用猪肝印片，学习如何制备肝印片的片子，而后进行固定、浸洗、染色等即可显示二者在细胞中的分布。 3、实验小结（15分钟）：总结实验过程中学生的操作是否规范；实验是否成功，如果不成功，问题出在哪里；哪些实验作得比较好。提醒预习下节课实验内容，提问。共150分钟。 凝集素是一类含糖、并能与糖专一结合的蛋白质,被认为与糖的运输、储存物质的积累、细胞间的互作以及细胞分裂的调控有关。 实验作业 细胞中脂类和核酸显示的原理是什么？ 参考资料 （含参考文献、期刊、杂志等） 实验总结 植物材料两种化学成分的显示结果都比较好，但是猪肝的效果较差，这可能与切片的厚度有很大的关系，猪肝组织柔软不像花生子叶好切。 细 胞 生 物 学 实验课程教案（3） 实验题目 细 胞 凝 集 反 应 实验学时 3 实验目的 1. 学习制备土豆凝集素 2. 掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝聚的原理。 3. 观察凝集的现象 实验原理 　 ①细胞质膜外表面的一层黏性多糖物质构成的细胞全委会被在细胞间的联系和识别、细胞的生长分化、免疫反应及肿瘤发生等过程中发挥着重要作用。　 ②动物细胞表面的糖蛋白、糖脂中的糖链伸向膜表面，它们是细胞识别、细胞免疫及细胞接触抑制现象的必要组分。　　③凝集素是一类含糖的(少数例外)并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果。　　④凝集素与糖分子结合有一定的专一性和结合