基本实验操作.pptVIP

刘文中 TLC 的一些技巧： 3.爬板：化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端， Rf值最好在0.15~0.85之间。一些标准溶剂和他们的相对极性如下： 强极性溶剂： 甲醇〉乙醇〉异丙醇 中等极性溶剂： 乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯 非极性溶剂： 环己烷，石油醚，己烷，戊烷 常用混合溶剂： 乙酸乙酯/己烷：常用浓度0~30%。但有时较难在旋转蒸发仪上完全除去溶剂。 乙醚/戊烷体系：浓度为0~40%的比较常用。在旋转蒸发器上非常容易除去。 乙醇/己烷或戊烷：对强极性化合物5~30%比较合适。 二氯甲烷/己烷或戊烷：5~30%，当其他混合溶剂失败时可以考虑使用 注意：要清楚爬板的目的，如反应监测什么东西，应根据目的使用适当的展开体系。 当目标监测物极性差别较大时用不同体系分别追踪，相互比较。 对于一些酸碱性较强的物质，爬板体系相应的可以加一些冰乙酸/甲酸或三乙胺/氨水 爬板拖尾严重时可以考虑稀释样品、换展开体系、或者调整酸碱。 4. 显示： TLC 爬板结束后就要想办法得到一个直观、可靠的显示方法。 实验室最常用的显示方法： a、大部分可用的紫外、碘、高锰酸钾溶液、硫酸乙醇、磷钼酸等。 b、专属显示剂： 茚三酮、溴甲酚绿、2，4-二硝基苯肼等等。 注意：一般建议至少采取两种以上的显示方法进行对比印证，以作出比较准确的判断。 柱层析： 柱层析是实验中最为简便、快速、有效的一个分离纯化手段。一般分为以下步骤：选洗脱体系、装柱、上样、洗脱、浓缩。 1、选洗脱体系： 从几个方面考虑：极性（TLC确定），溶解性，稳定性等。 只要你的化合物有极性区别，理论上没有分不开的柱子。所以一定要耐心，有几分象钓鱼。过柱子是一个经验活，主要凭感觉，因为它和你的待分离物的个数、各点间的间距、Rf值...均有关系，柱子过多了，就会感觉出一个合适的洗脱液以及极性。但也并非无规律可循， 过柱前爬板是必不可少的，试不同极性，找一个各点分离较开的极性，内径一厘米的柱子一般极性放大10倍左右，柱子越粗，极性放达越大。爬板时，如果待分点离开基线，而其下一点未动时的极性一般适于过柱。 板子的分离效果一般好于柱子，因为板子的粒度较细 高效板有差异的，用高效板跑的，在实际过柱时要再降低溶剂极性，一般板Rf在0.2～0.3适宜过柱 2、装柱：选择合适的填料，一般用的硅胶（正反相，显弱酸性）、碱性氧化铝（酸不稳定物适应）、大孔树脂等，注意填料的粒径。 装柱的时候要压紧,压平,使柱子中间没有气泡。 要根据样品量选定合适大小、长短的柱子，以及加入的硅胶量。 3、上样 一般采取干法和湿法两种。 干法适用于固体会粘度较大的液体样，低沸点溶剂溶解后加1~3倍重量的硅胶浓缩干，即可上样。 湿法：样品溶解在小极性溶剂中加1~2倍硅胶搅拌均匀至无气泡。上样时注意引流速度，防止将原先装柱硅胶冲起！ 4、洗脱 正相柱一般先用极性小的体系洗极性小的杂质，然后逐步加大极性。 要尽量使用毒性小的便宜的溶剂，做到节约成本。 主点未出，多接；主点快出来及快出完，少接。 5、浓缩 a、相关资料分析（文献、专利、实验记录等），对实验机理要 有基本的理解。 b、设计合适的反应规模。 a、针对已制定的反应规模，核算所需用到的试剂（包括各种起 始原料数量是否够用，质量是否合格，试剂是否需预处理） b、第一次做要根据参考文献的投料比例和方式进行，但在条件 优化时需综合考虑各种试剂的价格、后处理去除方法、安全系数 等方面因数，进而尝试合适的原料当量比。 a、针对已制定的反应规模，选择合适的反应仪器（反应瓶和配套 仪器的质量、大小； b、搅拌装置、加热/冷却装置、温度计等是否够用； c、是否需气体保护（一般情况下的反应都建议用气体保护，一定 要注意不能体系密闭！）； d、加料方式是否有特殊要求； e、各种塞子、管路是否安全可靠等） a、反应是否用到比较危险的试剂，如剧毒品、易燃易爆物、毒性 或味道较大的物质。一般情况下第一次操作一定要非常小心，充分 了解物质性质，如有条件最好请经验充分的前辈进行指导操作！一 定要