拟南泛素化课件.pptVIP

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2019-01-06 发布于福建
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拟南泛素化课件.ppt

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拟南泛素化课件

蛋白质修饰与基因表达 —— 蛋白质泛素化制作人：孟海涛丁锦君蛋白质的修饰包含甲基化，磷酸化，乙酰化，泛素化等，各种修饰在基因表达转录和翻译过程中发挥重要作用，本次讲泛素化在拟南芥脱落酸调控中的作用。首先了解和下面要讲到的几个名词泛素化；泛素化是对特异的靶蛋白进行泛素修饰的过程。在蛋白质分子一个位点上结合单个或多个泛素残基的现象。自泛素化：指本身含有结合泛素分子的能力，进行降解。这里特指KEG蛋白自降解过程 ?KEG基因：拟南芥的一段功能基因，翻译出KEG蛋白，此蛋白包含泛素化酶E3连接酶和激酶域。 KEG E3连接酶：协助泛素分子中间体结合到靶蛋白，降解靶蛋白作用。 ABI5：ABA的转录因子，在体内高表达时，会抑制种子的萌发和集体的生长。。 ABA;脱落酸，　指能引起芽休眠、叶子脱落和抑制生长等生理作用的植物激素。一，KEG基因： keg-1(KEG基因的双隐性突变体)，不产生KEG蛋白。 keg-1/35S:HA-KEG；有HA标记基因的单显杂合体，能产生KEG蛋白。 keg-1/35S:HA-KEGAA：有HA标记基因的单显杂合体，但不能产生完整功能的KEG蛋白，KEG基因部分区域被改变（29-cys,31-his,变成了Ala）。 KEG基因与ABI5关系 ABI5抗体杂交实验，检测ABI5表达量高低， keg-1(KEG基因的双隐性突变体)，不产生KEG蛋白，ABI5含量+++++ keg-1/35S:HA-KEG；有HA标记基因的单显杂合体，能产生KEG蛋白， ABI5含量+ keg-1/35S:HA-KEGAA；产生无活性的KEG蛋白， ABI5含量++ 通过许多其他实验证实： KEG蛋白中E3连接酶具有靶向连接ABI5泛素化作用，使之被26S蛋白酶体降解。使具有抑制植物生长发育的ABI5含量的降低，植物能生长。即KEG正常表达，降解ABI5含量，解除生长抑制，能生长。 KEG基因与ABA 以及通过其他实验证实：1.KEG过量表达，对ABA作用就失敏 2. KEG基因表达与泛素化作用蛋白酶体抑制剂MG132.抑制26S蛋白酶体对KEG蛋白降解。STAU激酶抑制剂，抑制KEG蛋白自泛素化。（所用的类型都为keg-1/35:HA-KEG）总结KEG与ABI5,ABA关系 * * * * * * *