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* （5）、心肌酶谱系列 17. α-羟丁酸脱氢酶: HBDH 参考值范围： 90～220U/L 用于AMI和亚急性心肌梗死的辅助诊断 18.肌酸激酶同功酶（CK-MB） 参考值范围： 0～10U/L 急性心肌梗塞发作后CK-MB急剧上升，48小时后消失 若CK-MB活力下降后再度升高，则示心肌梗塞复发 谢 谢！ * NADH（NADPH）摩尔吸光系数的测定 NADH（NADPH）没有标准纯制品，而且配成溶液后稳定性又较差，不能直接用NADH 或NADPH标准液来校正仪器，须通过有NAD+(NADP+)参与的反应途径。 * 用已糖激酶 (HK)或葡萄糖脱氢酶(GD)方法测定葡萄糖时，葡萄糖的消耗与NADH的生成呈等摩尔关系。葡萄糖有标准纯制品。 根据公式A=εbC，已知比色杯光径b和葡萄糖标准液浓度，测得葡萄糖标准管的吸光度A后便可计算出NADH（NADPH）的摩尔吸光系数ε为 A/bC。 * 测定方法 葡萄糖标准液浓度为1Ommo1/L(0.01mol/L)，标准液加入量为3.5μL，酶试剂加入量为335μL，比色杯光径为0.7cm，在340nm测得吸光度为0.465，则实测NADH摩尔吸光系数 = ＝6424，即在此台分析仪上 340nm波长处测得NADH（NADPH）的摩尔吸光系数为6424， 而理论上NADH（NADPH）的ε为6220。 * 校准K值 　 酶活性校准品经校准操作后由分析仪自动计算得出。在进行酶学测定时，如果分析条件的变化如温度、样品试剂加量和吸光度检测偏差可同等程度地影响校准物和待测样品，则使用校准品能进行补偿。一般来说以使用校准K值为好，但必须有两个先决条件：①必须使用配套的试剂；②必须使用配套的高质量的校准品，该校准品应具有溯源性。 * （四）透射比浊法 抗原与相应的抗体结合形成的免疫复合物，在反应液中具有一定的浊度，可由一般分光光度法进行透射比浊（transmission turbidimetry）测定，可用于某些蛋白质和药物浓度等的测定。该法须做多点校准，再经非线性回归，求出抗原或抗体的含量。 * 常用生化检测项目分析方法举例 1．终点法检测 　 常用的有总胆红素（氧化法或重氮法）、结合胆红素（氧化法或重氮法）、血清总蛋白（双缩脲法）、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、总胆汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、总胆固醇（胆固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白胆固醇（直接测定法）、钙（偶氮砷Ⅲ法）、磷（紫外法）、镁（二甲苯胺蓝法）等。 * 2．固定时间法 　苦味酸法测定肌酐采用此法。 * 3．连续监测法 对于酶活性测定一般应选用连续监测法，如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代谢物酶法测定的项目如：脲酶偶联法测定尿素等，也可用连续监测法 。 * 4．透射比浊法 透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目，多数属免疫比浊法，载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗“O”、类风湿因子，以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。 * 单波长和双波长方式 （一）概念 采用一个波长检测物质的光吸收强度的方式称为单波长方式。当反应液中含有一种组分，或在混合反应液中待测组分的吸收峰与其它共存物质的吸收波长无重叠时，可以选用。 使用一个主波长和一个次波长的称双波长方式。当反应液中存在干扰物的较大吸收、从而影响测定结果的准确性时，采用双波长方式更好。 * （二）双波长的作用 ①消除噪音干扰; ②减少杂散光影响; ③减少样品本身光吸收的干扰：当样品中存在非化学反应的干扰物如甘油三酯、血红蛋白、胆红素等时，会产生非特异性的光吸收，双波长方式可以部分消除这类光吸收干扰。 * （三）次波长的确定方法 当被测物的主波长确定之后，根据干扰物吸收光谱特征选择次波长，使干扰物在主、次波长处有尽可能相同的光吸收值，而被测物在主、次波长处的光吸收值应有较大的差异。 一般来说，次波长应大于主波长100nm。以主波长与次波长吸光度差来计算结果。 * 单试剂和双试剂方式 反应过程中只加一次试剂称单试剂方式，加两次试剂便为双试剂方式。 双试剂方式分析的优点是： ①可提高试剂的保存稳定性； ②能设置两点终点法； ③在某些项目检测时能消除非特异性化学反应 干扰。 * 双试剂方式消除非特异性化学反应干扰举例