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3.色谱法分离原理是什么？ 4.色谱分为几个相？ 5.按两相物理状态分类，色谱分为？ 6.什么是色谱峰？ 7.什么是色谱峰高？ 8.什么是保留时间？ 9.什么是保留体积？ 一、色谱法简介 色谱法也叫层析法，它是一种高效能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。 色谱法的最早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。 此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 二、色谱法的分类 色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。 （一）从两相的状态分类： 色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和液相色谱法（LC）。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱法和液相色谱法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。分类情况如下： （二）按固定相的形式分类： 按固定相的状态可分为： 柱色谱：固定相装在色谱柱中； 纸色谱：利用滤纸作载体，吸附 在纸上的水作固定相； 薄层色谱：将固体吸附剂在玻璃 板或塑料板上制成薄层作固定相。 （三）按分离原理分类： 可分为： 吸附色谱法：利用吸附剂（固定相 一般是固 体）表面对不同组分吸附能力的差别进行分 离的方法； 分配色谱法：利用不同组分在两相间的分配 系数的差别进行分离的方法。 离子交换色谱：利用溶液中不同离子与离子 交换剂间的交换能力的不同而进行分离的方 法。 空间排斥（阻）色谱法：利用多孔性物质对 不同大小的分子的排阻作用进行分离的方法。 三、气相色谱分离过程及有关术语 试样中各组分经色谱柱分离后，随气 体依次流入检测器，检测器将各组分浓度 变化转换成电信号，在记录仪上记录为检 测器响应随时间变化的微分曲线，即色谱 流出曲线，也称色谱图（见图12-2）。 5、保留值（Retation Value）是试样各组分在色谱柱中保留行为的量度，它反映了组分与固定相间作用力大小，通常用保留时间和保留体积表示。 （1）保留时间（ Retation Time）tR 指某组分通过色谱柱所需要的时间，即从进样到出现某组分色谱峰最大值的时间，单位为min或s。在一定的色谱体系和操作条件下，任何一种化合物都有一定的保留时间，这是色谱定性分析的依据。 （2）死时间（Dead Time）t0 不被固定相吸 附或溶解的气体（如空气、甲烷）从进样到 出现其色谱峰最大值所需要的时间，也是气 体流经色谱柱中空隙所需要的时间。 （3）调整保留时间（Adjust Retation Time） tR 扣除死时间之后的保留时间： tR = tR – t0 ，它反映了组分在色谱过程中，与固定相 相互作用所消耗的时间，是各组分产生差速 迁移的物理化学基础。 （4）保留体积VR （ Retation Volume ）是 指从进样到出现某组分色谱峰最大值时所 对通过的栽气体积。 VR = tR·F0 F0为色谱柱出口的载气流量（mL · min-1） （5）死体积V0 （ Dead Volume ）指在t0这 段时间内通过色谱柱的载气体积。 V0 = t0·F0 （6）调整保留体积VR （ Adjust Retation Volume ）指扣除死体积后的保留体积。 VR = VR - V0 （7）相对保留值（Relative Retation value） 指在相同的操作条件下某组分2的调整保留 值与另一种组分1的调整保留值之比。 相对保留值仅与柱温和固定相性质有关， 而与载气流量等其它实验条件无关，因此，它 是色谱定性分析的重要参数之一。 相对保留值还可以用来表示色谱柱的选择 性。R2,1值越大，两组分的tR 值相差越大，越 容易实现分离，当R2,1 =1 时，两组分色谱峰重 叠。 从色谱流出曲线可以获得许多重要信息： 1.根据色谱峰的数目，可以判断试样中所 含有组分的最少个数。 2.根据色