分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力实验原理的教学术.PDFVIP

生物学通报。…一． ， 分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力实验原理的教学术 林万华 骆海玉 杨栋林 刘晓灿一 (广西师范大学生命科学学院 广西桂林541004) 摘要 分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力的实验原理包括光吸收、朗伯一比尔定律、分 光光度计仪器工作原理和生物化学反应原理。论述在生物化学实验教学中既要重视生物化学 知识原理，也要重视实验仪器基本工作原理，有刺于学生触寒旁通，利用所学知识分析和解决 科学实验或生产，实践中遇到的问题。 关键词。血清谷丙转氨酶 活性测定 分光光度法 实验原理 教学 中目图书分类号：G640，文献标识码：A 生物化学实验教学对学生理解和掌握生物化 互补光颜色。例如KMnO。溶液是因为强烈吸收了 学理论知识、掌握相关实验技能、提高实践动手能 绿青色光而呈紫红色[1。2]。 力和创新能力起着重要作用。它本身具有完整的理 绿 黄 l 青 论体系，所涉及的分光光度法、龟泳、层析和离心等 ＼I／ 实验技术已应用到科学研究和生产的各个方面。在 橙——自光——昼 生物化学实验教学中既要重视生物化学知识，也要 ／||＼ 重视实验仪器工作原理。本文以分光光度法测定血 红 I 蓝 清谷丙转氨酶活力为例谈实验原理的教学。 紫 1 让学生树立光吸收的概念 图1 互补色光示意图 对于光吸收，有的学生或许感觉新奇，、高深而 被测物质分子对特定波长光具有选择性强烈 迷惑不解。其实光吸收是常见现象，物质的颜色决 趿收是分光光度法分析的理论基础。同一种物质 定于其对光线的吸收和反射，如绿叶是因为照射 对不同波长光的吸光度是不同的，对某一波长的 到叶子上的太阳光被吸收掉蓝光与红光后反射绿 光吸收最强烈则对应的波长称为最大吸收波长 光进人到人眼。理论上只具有一种波长的光称为 入一。实验中通过检测特定物质在最大吸收波长 单色光，而生活中单色光是指波长处于很翟范围、． 入妇的吸光度测定其含量‘2q]。溶液呈现的颜色决 1为人眼识别成相同颜色的光。由不同波长组成的光 定于物质的结构；而溶液颜色深浅则与溶液的浓 nm 度相关。分光光度法测定血清谷丙转氨酶活力实 称为复合光，例如太阳光是复合光，由400～760 波长范围内i的红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等颜色的 验是利用反应产物丙酮酸一2，4一二硝基苯腙对 520 9光按一定比例混合而成。如果将2种单色光按适 nm光波的具有强烈吸收的特性，通过测定溶 当强度牝．例混合后组成白光，则这2种单色光称 液对520nm光波吸光度测定棕红色的丙酮酸一 为互补色光，图1中处予直线关系的2种颜色的-2，4一二硝基苯腙含量，也即丙酮酸的生成量，从 光是互补色光[1之]。溶液之所以呈现不同的颜色是 而测定血清谷丙转氨酶活力[4‘5]。通过这些，日常生 由于溶液中的质点(离子或分子)对可见光的选择 活所见颜色分析与解释光吸收及其应用，激发学 性强烈吸收而呈现其互补光颜色的结果。如果溶 生的学习兴趣，树立光吸收的概念。 液物质对各种颜色的光均不吸收或者各种颜色的 2与学生共同复习朗伯一比尔定律 光