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4.菌种的保存 固体斜面培养基上4℃保存,菌种易被污染或产生变异 3.微生物的恒温培养 ⑵.长期保存: -20℃甘油管在 冷冻箱中保藏 ⑴.临时保藏: 四、课题成果评价 (一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 本课题知识小结: 【典例解析】 例:关于微生物营养物质的叙述中,正确的是( ) A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。 D 例2. 下面对灭菌的理解不正确的是( ) A. 防止杂菌污染 B. 消灭杂菌 C. 培养基和发酵设备都必须灭菌 D. 灭菌必须在接种前 B 练习 3.外科手术器械和罐头食品的处理,要以能 够杀死什么为标准 A 球菌 B 杆菌 C 螺旋菌 D 芽孢 天然培养基有血清、血浆和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液) 优点:营养成分丰富,培养效果好 缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染。 天然培养基: 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物 加入四环素、卡那霉素等抗生素的培养基: 分离导入了目的基因的受体细胞 可抑制细菌、放线菌细胞壁主要成分肽聚糖的合成 其细胞壁是由纤维素、几丁质、葡聚糖组成 练习 1.不能作为异养微生物碳源的是( ) A.牛肉膏 B.含碳有机物 C.石油 D.含碳无机物 D 2.下列关于生长因子的说法中,不正确的一项是 ( ) A.是微生物生长不可缺少的微量有机物 B.是微生物生长不可缺少的微量矿质元素 C.主要包括维生素、氨基酸和碱基等 D.一般是酶和核酸的组成成分 B 4.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在碳源为纤维素的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素,可以抑制细菌和放线菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( ) ①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④纤维素分解菌 A.④② B.①② C.①③ D.③④ 解析:选A。本题考查了微生物分离知识。纤维素分解菌可以利用纤维素,大部分微生物却不能;培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌,但霉菌能够生长。 思考: 1. 获得纯净培养物的关键? 2. 无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?(P15旁栏思考) 3. 消毒和灭菌有何不同? 4. 常用的消毒和灭菌方法有哪些? 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 ㈣.无菌技术 防止外来杂菌的入侵 [思维激活] 用酒精擦拭实验者手臂属消毒还是灭菌?70%与95%的酒精,哪一种效果更好?为什么? 提示 酒精擦拭属化学消毒,酒精消毒时,70%的酒精杀菌效果最好。原因是:浓度过高,使菌体表面蛋白质凝固成一层保护膜,乙醇分子不能渗入其中;浓度过低,杀菌力减弱。 (1)消毒和灭菌的区别 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮
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