《临床免疫学和免疫学检验》教案首页.PDF

安徽理工大学医学院 S c h o o l o f M e d i c i n e 《临床免疫学与免疫学检验》教案首页 次课 授课时间 年 月 日 教案完成时间： 年 月 日 临床免疫学 课程名称 与免疫学检 年 级 专业、层次 医学检验 （本科） 验 专业技术 授课方式 教 师 张荣波 大 学时 4 职 务 （大、小） 授课题目 （章、节） 第九章 荧光免疫技术 基本教材或主要参考书 王兰兰 主编 《临床免疫学与免疫学检验》（ 三版，人民卫生出版社） 教学目的和要求： 了解：荧光的基础知识，免疫荧光技术在医学检验中的应用。 熟悉：荧光抗体的制备：抗体与荧光素的结 、标记抗体的纯化、荧光抗体活性鉴定。 掌握：荧光显微技术：标本制作、荧光抗体技术的主要类型及原理，荧光色素、荧光效率、荧光抗体、荧光寿命 的概念。 大体内容与时间安排，教学方法： 第一节 荧光的基本知识 1 学时 第二节 荧光抗体的制备 1 学时 第三节 免疫荧光显微技术 1 学时 第四节 免疫荧光技术在医学检验中的应用 1 学时 教学重点、难点： 重点：荧光显微技术：标本制作、荧光抗体技术的主要类型及原理， 难点：荧光色素、荧光效率、荧光抗体、荧光寿命的概念。 教研室审阅意见： （教研室主任签名） 年 月 日 （教案续页） 辅助手段和时间 基 本 内 容 分 配 备 注 1 荧光免疫技术(fluoroimmunoassay)是免疫标记技术中发展最早的一 种检测方法，其将免疫学反应酶异性与荧光技术的敏感性结合起来。基本 原理是：利用荧光素标记抗体，使之在涂片上或组织切片上以一定的条件 与标本中的待测抗原特异性地结 ，通过高发光效率的点光源，经过滤色 板发出一定波长的光，使标本结 的荧光素激发而产生荧光，借助荧光显 微镜来进行观察，可以判断待测抗原或抗体的有无。荧光免疫技术被广泛 地应用于临床检测和科学研究。 第一节 荧光的基本知识 一、荧光现象 荧光就是某些物质受到一定波长光的激发后，在极短的时间内发射出 的波长大于激发光波长的光。 二、荧光技术中有关的概念和参数 1．发射光谱 指固定激发波长，在不同波长下所记录到的样品发射荧光的相对强度。 2．激发光谱 指固定检测发射波长，用不同波长的激发光激发样品所记录到的相应 的荧光发射强度。 3．荧光效率 荧光物质不会将全部吸收的光能都转变成为荧光，荧光效率是指荧光 物质将吸收的光能转变序为荧光的百分率。 荧光效率=发射荧光的光量子数 （荧光强度）/吸收光的光量子数 （激 发光强度） 不同的荧光物质各有其特定的吸收光谱和发射光谱，即在某一特定波 长处有最大吸收峰和最发射峰。选择激发光波长在最接近于荧光物质的最 大吸收峰的波长，而且测定光波长也设定在最接近于最大发射光波峰时， 可得到最高的荧光效率。 4．荧光寿