睑板腺癌中ras三sf1a基因的甲基化状态及表达-眼科学专业毕业论文.docx

优秀毕业论文 精品参考文献资料 河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表 与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则，承担相应法律责任。 研究生签名：嚏蛟 导师签 二级学院领号盖章；， _、，j 知J珲．}．．?月臼日 ，_ f 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了 文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写， 文责自负。 研究生签名：坂 导师签章： 己S 日 万方数据 洲1 洲1 11111 1 1111 IIIIIIIII IIIIIILIllll帅 Y2784774 目 录 中文摘要 1 英文摘要 4 英文缩写 7 研究论文睑板腺癌中RASSFlA基因的甲基化状态及表达 前言月|J舌 88 材料与方法 8 结果 16 附图 18 附表 2l 讨论 24 结论 29 参考文献 30 综述睑板腺癌与肿瘤抑制基因RASSFlA的研究现状 34 致谢 46 个人简历 47 万方数据 中文摘要睑板腺癌中 中文摘要 睑板腺癌中RASSFlA基因的甲基化状态及表达 摘要 目的： 睑板腺癌(meibomian gland carcmoma，MGCA)尽管属于恶性程度很 高的恶性肿瘤，却很少出现在国外的文献上，而在国人眼睑恶性肿瘤中， 其发病率仅次于基底细胞癌，位居眼睑恶性肿瘤的第2位(约占32．7％)。 且呈增长的趋势。该肿瘤具有明显的浸润性和侵袭性，临床很容易误 诊，出现复发、转移，并且治疗上很棘手，严重威胁着患者的视力和生 命。要降低睑板腺癌的发病率和死亡率，必须重视其发病机制的研究以 做到早期诊断。除DNA核苷酸序列改变可影响肿瘤发生发展外，表观 遗传学机制在肿瘤形成过程中的作用越来越受到重视，肿瘤中普遍存在 DNA甲基化状态的改变，表现为总体的甲基化水平降低与局部的甲基化 水平升高，即抑癌基因与修复基因的高甲基化与反转录转座子、癌基因的 去甲基化，这预示着它可作为一种新的肿瘤形成敏感指标，甚至应用于 肿瘤的预防和治疗。 RASSFIA是定位在染色体3p21．3片段上的，并在2000【1j年被 Dammann等研究人员发现的新型的Ras因子。它是(RASSFlA， RASSFlH)七种亚型中的一种且隶属于RASSFl家族(Ras Association Domain family 1)，后面相关的研究发现其是一个新型的抑癌基因，其失 活可以诱发产生各类恶性肿瘤，在人类的肿瘤中，RASSFIA基因几乎从 不发生突变，启动子甲基化在RASSFIA表达中发挥主要作用。RASSFlA 被发现在肿瘤中是除了P16基因以外，甲基化的程度最广泛以及最高的 一种基因之一。由于对在肿瘤中RASSFIA表达缺失和启动子区高甲基化 的不断研究发现，其对肿瘤的发生和发展起非常重要作用。因而可认为 RASSFlA基因的甲基化改变可成为早期发现肿瘤的关键候选指标之一。 方法： 1应用免疫组织化学(immunohistochemistry)SP法检测40例睑板腺癌 组织及相应癌旁正常组织中RASSFlA蛋白的表达情况。 2应用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chmn 万方数据 中文摘要reaction 中文摘要 reaction，MSP)技术检测40例睑板腺癌组织及40例正常组织中RASSFlA 基因的甲基化状态。 3运用统计软件SPSSl3．0对数据进行统计学分析。 结果： 1 RASSFlA基因甲基化状态：40例睑板腺癌中，29例癌组织存在 RASSFlA基因启动子甲基化，甲基化频率72．5％但9／40)；40例正常睑板 腺中，6例组织存在RASSFlA基因启动子甲基化，甲基化频率 15％(6／40)。睑板腺癌RASSFlA基因启动子甲基化率明显高于正常睑板 腺，两组比较差异有统计学意义(#_22．236，P--0．0000．01)。进一步 分组分析发现，RASSFlA基因该位点甲基化率与患者年龄患者胗O．05)、 性别(胗O．05)、肿瘤组织TNM分期(胗O．05)、分化程度(尸O．05)、有无 复发(尸O．05)无相关性。 2 RASSFlA蛋白表达情况：40例睑板腺癌中，11例RASSFlA蛋白 表达阳性，表达率27．5％(1 1／40)；40例正常睑板腺RASSFlA蛋白阳