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细胞融合物在HAT培养基上的选择结果图 同一药物 对不同种类细胞的作用差异。 一种亲本细胞对A药物敏感， 而对B药物不敏感； 另一种亲本细胞对B药物敏感，而对A药物不敏感。 一定量A、B于培养液中培养细胞?两种亲本细胞被杀死，融合细胞存活， 抗药性选择系统： 营养缺陷型筛选：有些细胞在一些营养物（如氨基酸、糖、嘌岭、嘧啶或维生素等）的合成能力上出现缺陷→难在缺少这种营养成分的培养基中存活（该营养的营养缺陷型细胞）。 亲本细胞 　　色氨酸缺陷型， 　　苏氨酸缺陷型， 选择性培养基中不加入色氨酸和苏氨酸?只有融合所形成的杂种细胞才能生长。 4. 杂种细胞的表型 杂种细胞（与亲本细胞相比）在遗传表型上变化： １）互补作用：两亲本细胞的某些生物学特性在杂种细胞中共同表达的现象。 免疫淋巴细胞 分泌抗体，体外培养不能生长； 小鼠骨髓瘤细胞 　　体外生长。 杂种细胞 既体外生长又分泌特定的抗体。 ２）激活作用：某一亲本细胞的不活动基因在杂种细胞中被激活的现象。 HPRT-及HPRT+人的细胞分别与HPRT-小鼠细胞杂交， 两种杂种细胞 均显示出正常小鼠的HPRT酶活性， 人的细胞具有激活小鼠细胞HPRT基因的作用。 ３）消失作用：亲本的某一或某些性状在杂种细胞中消失的现象。 金黄色仓鼠黑色素瘤细胞 很高的多巴氧化酶活性，可催化酪氨酸形成黑色素， 但与不产生黑色素的小鼠成纤维细胞融合的杂种细胞 不产生黑色素 表明多巴氧化酶基因在杂种细胞中被抑制而呈隐性。 ４）激活与消失作用：杂种细胞中出现的同一亲本细胞的某一些非活动基因被激活，而另一些遗传性状同时消失的现象。 小鼠胚胎发育早期的胸腺细胞能表达t12抗原，但成年后不表达t12抗原而表达H-2抗原， 说明其带有t12和H-2两种抗原的基因，但在不同的发育阶段不同的基因之间表达存在差异。 当成年小鼠的胸腺细胞与小鼠胚胎性癌细胞融合所形成的杂种细胞中，H-2抗原基因呈隐性，而t12抗原基因呈显性。 两种亲本细胞的遗传物质融合在一个细胞中后，某些遗传物质经过一段时间后可能会逐渐消失，其结果是由该基因所控制的性状也就随之消失。 遗传物质虽然存在，但在杂种细胞中可以表现出其基因性状（显性），也可能不表现出其基因性状（隐性）。 细胞重组：在体外条件下运用一定的实验技术从活细胞中分离出各种细胞的结构或组成“部件”，再把它们在不同的细胞之间重新进行装配，而得到新的生物活性细胞。 第三节 细胞重组（cell econstruction） 一、核移植技术 （nuclear transplantation） 　　借助显微操作仪，利用微吸管将一个细胞的细胞核吸出并移植到另一个去核的细胞中。 最初　　鱼类和两栖类动物 　　　　后扩展到高等哺乳动物　　小鼠和家养动物等 二、细胞器移植 细胞器种类很多，分离与纯化也较容易，不过研究较多的是叶绿体和线粒体的移植。 （一）叶绿体移植： 　　叶绿体 进行光合作用，把太阳能转变为化学能。　 高光合效率作物的叶绿体转移到低光合效率作物中?增产。 叶绿体移植的方法： 　　将分离纯化的叶绿体与原生质体一道培养，通过细胞的胞饮作用将叶绿体摄入原生质体，经过培养，原生质体再发育成完整的植株 （二）线粒体移植： 　　线粒体有自己的遗传基因，能够合成一些蛋白质。 线粒体的移植，可传递遗传信息，改变受体细胞的某些特征，如抗药性和雄性不育性等。 移植方法：微注射、载体转移、胞饮摄入等。 第四节　　 单克隆抗体技术 　　外源性物质侵入人体或动物体时?免疫反应。 即，B淋巴细胞激活、增殖、分化成浆细胞?抗体（体液免疫）（血清、体液、外分泌液）。 获得一定特异性抗体的经典方法： 用抗原免疫动物（如兔、马、羊、鼠等），从其血清中进行分离。 多个抗原表位（决定簇）?针对多种抗原表位的混合抗体（多克隆抗体）。 缺陷： 　　1、抗体不均一，特异性差，效价低，用于检测会影响检测的精确性和灵敏度； 　　2、成熟的能分泌抗体的淋巴细胞寿命很短，一般只有几天，抗体的产量有限，无法实现大规模生产。 骨髓瘤（恶性肿瘤）细胞 　　体外培养、无限制繁殖，但不能产生抗体， 　　遗传表现型　　HPRT+-TK+、HPRT+- TK- 　　　　　　　　　　　　　及HPRT-- TK+ 免疫淋巴细胞 产生抗体，但不能在体外长期培养和 　　　　无限期繁殖，