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第二部分
硬件基础知识
HPLC简易流程图
脱气机
色谱柱
进样器 检测器
输液泵 柱温箱
储液瓶 数据处理系统
储液瓶
由机械性能和化学稳定性好的不锈钢、玻璃或聚
四氟乙烯材料制成
使用过程中储液瓶应适当密闭
所有溶剂应先过滤,再装入储液瓶
溶剂前处理-过滤
过滤:0.45 μm或更小孔径滤膜
目的:除去溶剂中的微小颗粒,避免堵塞
色谱柱,尤其是使用无机盐配制的缓冲液
滤膜类型:
聚四氟乙烯滤膜:适用于所有溶剂,酸和盐。
醋酸纤维滤膜: 不适用于有机溶剂,特别适用
于水基溶剂。
尼龙66滤膜: 适用于绝大多数有机溶剂和
水溶液,可以用于强酸,不适
用于DMF,THF, CHCl 等溶剂
3
再生纤维素滤膜:蛋白吸收低,同样适用于水溶
性样品和有机溶剂
溶剂前处理-脱气
脱气:除去流动相中溶解或因混合而产生的气泡
气泡对测定的影响:
1)泵中气泡使液流波动,改变保留时间和峰面积
2)柱中气泡使流动相绕流,峰变形
3)检测器中的气泡产生基线波动
常用脱气方法
超声脱气
减压脱气
在线脱气
脱气机-在线真空脱气
脱气机主要由脱气管、
真空室和真空泵组成。 真空室
脱气管
到泵
真空室内的脱气管由特
殊的透析材料制成,当
溶剂流经脱气管时,溶
解在溶剂中的气体穿过
管壁被脱出。
储液瓶
输液泵
性能要求
– 能在高压下连续工作
– 输出流量范围宽
– 输出流量稳定、精确度、重复性高
8
岛津输液泵系列
目的 单元 流速范围 特性和应用
LC-20AT 0.001-10ml/min 非凡的耐用性,适于常
LC-15C 量分析
分析
LC-20AD 0.0001-10ml/min 极低脉动,适于半微量
LC-30A 0.0001-5ml/min 和 LC-MS分析
LC-20AB 0.0001-10ml/min 极低脉动,适于半微量LC
和 LC-MS分析
LC-20AT
选配件
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