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1.下列关于高倍物镜使用的叙述中,正确的是( ) A.因为藓类的叶片大,在高倍镜下容易找到,所以可以直接使用高倍物镜 B.在低倍镜下找到叶片细胞,即可换高倍物镜 C.换高倍物镜后,必须先用粗准焦螺旋调焦,再用细准焦螺旋调至物像最清晰 D.为了使高倍镜下的视野亮一些,可使用最大的光圈或凹面反光镜 解析:材料无论大小,都必须先用低倍物镜找到比较满意的部位,将其移到视野的中心后再换高倍物镜,这时,只能使用细准焦螺旋调焦。 答案:D 2.如下图所示,1、2为物镜长度;3、4为目镜长度;5、6为当成像清晰时物镜与标本切片距离大小。若载玻片位置不变,在一个视野中看到细胞最多的正确组合是 ( ) A.1、3、5 B.2、4、6 C.2、3、5 D.1、4、6 解析:显微镜的放大倍数=物镜放大倍数×目镜放大倍数。对于目镜来讲,放大倍数越大,镜头越短;对于物镜来讲,放大倍数越大,镜头越长。成像清晰时,镜头与载玻片之间的距离越小,视野中所观察的细胞数目越少。在视野中观察到最多的细胞时,显微镜放大倍数最小,物镜、目镜都选用放大倍数小的,镜头与载玻片距离最大。 答案:D 3.下所示光学显微镜的一组镜头,目镜标有5×和15×字样,物镜标有10×和40×字样。请看图回答: (1)要仔细观察叶绿体的形态时,显微镜的目镜、物镜的组合应为________(用标号作答)。此时放大的倍数为________。 (2)在观察叶绿体时,③与④的显微视野中比较明亮的是________。 (3)若在低倍镜视野中发现有一异物,当移动装片时,异物不动,转换高倍镜后,异物仍可观察到,此异物可能存在于 ( ) A.物镜上 B.目镜上 C.装片上 D.反光镜上 解析:此题考查显微镜的结构和功能。 (1)显微镜的镜头有两种:目镜和物镜。目镜可从镜筒上端开口处插入,目镜长度与放大倍数成“反比”。物镜的上端有螺丝口,可旋转固定在镜筒下端连接的转换器的三个开口上。物镜长度与放大倍数成“正比”。显微镜的放大倍数为目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。 (2)显微镜视野的明亮程度与物镜镜头的通光量有关,低倍物镜放大倍数小,实际观察到的标本区域较大,通光量较大,因而视野明亮;高倍物镜放大倍数大,实际观察到的标本区域较小,通光量较小,因而视野较暗。 (3)视野中出现异物有三种情况:物镜上、目镜上和装片上。移动装片,异物不动,说明不在装片上;转动转换器,换上高倍镜后,仍可观察到,说明不在物镜上;只有存在于目镜上。 答案:(1)②③ 600 (2)④ (3)B 扫描电镜技术 扫描电镜(SEM)是20世纪60年代才正式问世的。在扫描电镜中,电子枪发出的电子束被汇聚成极细的电子“探针”,在样品表面进行“扫描”,电子束扫到的地方就可激发样品表面放出二次电子(同时也有一些其他信号)。二次电子产生的多少与电子束入射角度有关,也即是与样品表面的立体形貌有关。与此同时,在观察用的荧光屏上另一个电子束也做同步的扫描。 二次电子由探测器收集,并在那里被闪烁器变成光信号,再经光电倍增管和放大器又变成电压信号来控制荧光屏上电子束的强度。这样,样品上产生的二次电子越多的地方,在荧光屏上相应的部位就越亮,我们就能得到一幅放大的立体图像。 扫描电镜主要是用来观察样品的立体形态,而生物样品在干燥过程中由于表面张力的作用极易发生皱缩塌陷等,因此,在样品制备中首先要解决失水变形。目前最常用的是临界点干燥法,即利用许多物质在其临界温度以上就不再存在气液相面的性质,将样品在较低温度下用液态CO2等介质浸透,然后在临界温度以上使介质以气态形式逸去。由于没有气液相面形成,也就没有表面张力,样品的形态能够很好地保持。此外,为了得到良好的二次电子信号,样品表面应当是导电的,以防止电荷积累。所以样品在观察前还要喷镀一层金属薄膜。 扫描电镜深长,成像具有强烈的立体感,适宜观察复杂精细的立体表面结构。此外,在电子束轰击下,样品中的不同原子还会发出具有特定波长的X射线,若收集X射线信号,则可以用扫描电镜对样品各个微区的元素成分进行分析。扫描电镜的缺点一是分辨率较低(一般6~10 nm),二是不能观察样品的内部结构。 最近,一种低压扫描电镜用于观察生物样品,把扫描电镜的分辨提高到透射电镜的水平(2~3 nm),最高可达0.8 nm。其原理是当扫描电压从30 kV降至1.5 kV时,电子束对样品的损伤大大减少,样品表面的电荷积累也大大减少,电子束穿透能力也减弱,这样发出的二次电子更接近样品表面,不需喷镀金属膜或仅喷极薄的一层即可,这样看到的样品结构既真实,分辨率
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