红细胞血型及相关检测.pptVIP

主要内容 ABO血型鉴定 RhD血型鉴定 交叉配血试验 红细胞抗体筛查及鉴定 血型鉴定和交叉配血自动分析 吸收放散试验 教学目标 掌握ABO和Rh血型鉴定、交叉配血试验原理、方法和质量控制 熟悉红细胞不规则抗体筛查及鉴定方法 了解吸收放散试验 一、ABO血型鉴定 （一）盐水介质试管法 （二）盐水介质玻片法 （三）微柱凝胶血型定型检测卡法 （四）质量保证：试管法、玻片法、卡式 （五）方法学评价 （六）临床应用 （七）不一致原因及解决方法 ABO血型鉴定原理 ABO血型鉴定结果判断 （四）质量保证 试管法 标记 加样量、加样顺序 溶血是一种阳性反应 玻片法 标记 正定型 显微镜阴性确认 微柱凝胶血型定型检测卡 血清标本应完全取出纤维蛋白，血浆标本建议EDTA-K2或枸橼酸盐康宁 先加红细胞悬液，再加血浆或抗体试剂 红细胞悬液和血浆各加50ul 按照说明书操作 （五）方法学评价 ABO正反定型的临床意义 输血治疗的首要步骤 组织器官移植 新生儿溶血病 ABO正反定型不符分析基本程序 首先重复试验 重新采集献血者与受血者血液标本 查询受血者既往病史及输血史和用药史等 多次洗涤标本红细胞 应用抗-AB、抗-A1、抗-H检测红细胞 ABO正反定型不一致的原因 RhD定型及其常见问题 三、交叉配血试验 概念：检测受血者和供血者血液中是否含有不相配合的成分，是输血前确保受血者输血安全必不可少的试验 包括：主侧配血和次侧配血 主侧是受血者血清与供血者红细胞相配的一侧 次侧是受血者红细胞与供血者血清相配的一侧。 （一）盐水介质交叉配血试验 本质凝集反应，直接凝集试验 检测IgM类抗体 方法：试管法 ABO同型配血，主侧和次侧均无凝集及溶血，表示无输血禁忌，可以输血 盐水介质配血方法 （二） 抗球蛋白介质交叉配血试验 抗人球蛋白试验：又称Coombs试验，是一种检查不完全抗体的敏感方法 分类：直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验 抗球蛋白试验原理 Coombs利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，使红细胞凝集。 直接试验：是检查被检红细胞上有无不完全抗体 间接试验：是检查血清中游离的不完全抗体 抗球蛋白配血方法 抗球蛋白方法配血方法 结果判读 直接抗球蛋白试验 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管凝集，判定为阳性 阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，被检管不凝集，需要做阴性确认后判定结果（无凝集的被检管中加入IgG抗-D致敏红细胞后离心，出现凝集判阴性，否则重新试验 阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管凝集，结果不可信不发报告，分析原因重做 结果判读 间接抗球蛋白试验 阳性对照管呈现凝集反应，阴性对照管未呈现凝集反应，被检管呈现凝集反应为阳性结果，被检者血清内含有抗体，如果自身对照无凝集，同种抗体；如果被检者结果阴性，被检者血清中未被查出意外抗体。 阳性对照管不凝集和（或）阴性对照管出现凝集，实验失败。 间接抗球蛋白试验 （三） 低离子聚凝胺介质交叉配血试验 聚凝胺介质试验技术 红细胞表面带有大量的负电荷，悬浮在电解质溶液中，会吸引大量阳离子，红细胞则被扩散的双层离子云所围绕，形成zeta电位。 原理 聚凝胺技术首先利用低离子溶液（LIM）降低介质的离子强度，减少红细胞周围的电子云 再加入聚凝胺溶液，溶解后产生很多正电荷，中和红细胞表面带有的负电荷，红细胞zeta电位降低，缩短红细胞距离，产生非特异性聚集 最后加入悬浮液，具有中和聚凝胺阳离子的作用，使正常红细胞的非特异性凝集散开，特异性凝集仍然存在 聚凝胺(Polybrene)配血方法 聚凝胺(Polybrene)配血方法 方法学评价 盐水介质法：适用于ABO血型交叉配血，操作简单、快速，不能检出不相配合的IgG类抗体 抗球蛋白试验：结果准确，检测不完全抗体最可靠的方法，操作繁琐费事，试剂较贵 低离子聚凝胺介质法：应用广泛、快速、准确，可检测IgM、IgG类抗体，需特殊试剂，操作复杂。 临床应用 可以发现ABO血型鉴定的错误，如A亚型 发现亚型配血不合的情况 发现其他血型抗体或不规则抗体 四、红细胞抗体筛查与鉴定 《临床输血技术规范》 第四章第17条：“凡遇以下情况必须按《全国临床检验操作规程》有关规定做抗体筛选试验：1.交叉配血不合的； 2.对有输血史、妊娠史或短期内需接受多次输血者 为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查 1.目前已知红细胞有30个血型系统（近300个抗原）。红细胞抗原的多样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、Rh血型以外）而引发的溶血。 2.临床有的病人出现慢性（迟缓性）溶血反应，易忽