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常见化学发光免疫分析技术比较 1、化学发光免疫分析 (chemiluminescenceimmunoassay CLIA) 化学发光免疫分析 ， ， 英音：[,kemi,lju:minesəns] [,imju:nəuəsei] 是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应 相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素 和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析 和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项必威体育精装版免疫测定技术。 CLIA 是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫 反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维 生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫 分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项必威体育精装版免疫测定技 术。 1.1、化学发光免疫分析原理 化学发光免疫分析包含两个部分 即免疫反应系统和化学发光, 分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和 氧化剂的氧化 形成一个激发态的中间体 当这种激发态中间体回到, , 稳定的基态时 同时发射出光子, (hv) , 利用发光信号测量仪器测量光 量子产额。免疫反应系统是将发光物质 在反应剂激发下生成激发态( 中间体 直接标记在抗原化学发光免疫分析 或抗体 免疫化学发光) ( ) ( ) , 分析 上 或酶作用于发光底物。 1.2、化学发光免疫分析类型 化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种: (1)化学发光标记免疫分析法; (2)酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析 法 1.2.1 化学发光标记免疫分析 化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CLIA) , 是用化 学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发 光物质有吖啶酯类化合物-acridiniumester (AE) , 是有效的发光标记 物，其通过起动发光试剂(NaOH-H O ) 作用而发光 强烈的直接发, 2 2 光在一秒钟内完成 为快速的闪烁发光。吖啶酯作为标记物用于免疫, 分析 其化学反应简单、快速、无须催化剂 检测小分子抗原采用竞, ; 争法 大分子抗原则采用夹心法 非特异性结合少 本底低 与大分, , , ; 子的结合不会减小所产生的光量 从而增加灵敏度。, 1.2.2 化学发光酶免疫分析 从标记免疫分析角度 化学发光酶免疫分析, (chemiluminescent enzymeimmunoassay CLEIA) , , ， 应属酶免疫分析 只是酶反应的底物 是发光剂 操作步骤与酶免分析完全相同 以酶标记生物活性物质, : (如酶标记的抗原或抗体 进行免疫反应 免疫反应复合物上的酶再) , 作用于发光底物 在信号试剂作用下发光 用发光信号测定仪进行发, , 光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶 (ALP) , 它们有各自的发光底物。 12.2.1 HRP 标记的CLEIA (3- ,luminol) , 常用的底物为鲁米诺 氨基邻苯二甲酰肼 或其衍生 (4- ) , 物如异鲁米诺 氨基邻苯二甲酰肼 是一类重要的发光试剂。其结 4