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影响酶活性的因素 唾液淀粉酶对淀粉的消化 一、目的 1、了解酶的特异性。 2、了解温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素对酶反应速度的影响。 3、掌握检查酶的特异性,酶的激活剂和抑制剂影响酶反应速度的方法及原理。 二、原理 酶是生物体中具有催化功能的蛋白质,因此也叫生物催生剂。生物体内存在多种多样的酶,从而使生物体在温和的条件下能迅速完成复杂的生物化学反应。 特异性 酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种酶能对一种化合物或一类化合物起催化作用,而不能对别的物质发生催化反应。 淀粉和蔗糖无还原性。唾液淀粉酶水解溶粉生成有还原性的麦芽糖,但不能催化蔗糖水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性的葡萄糖和果糖,但不能催化淀粉水解,用Benedict试剂检查糖的还原性。 温度和pH 温度和pH对酶的活性有显著的影响,使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。大多数动物酶的最适温度为37℃~40℃,植物酶的最适温度为50℃~60℃ 能使酶表现其活性最高时的pH值称为该酶的最适pH值,不同酶的最适pH值不同。 酶的抑制剂与激活剂 酶的活性常受某些物质的影响,能使酶活性增加的物质称为酶的激活剂,能使酶的活性降低的物质称为酶的抑制剂。 氯离子为唾液淀粉酶的激活剂,铜离子为其抑制剂。 三、材料、试剂与器具 (一)试剂 蒸馏水 1%淀粉液 1%蔗糖液 0.1%尿素液 大豆尿素酶溶液 0.1%CuSO4 0.1%HgCl2 0.1%NaCl 1M NaOH 0.5M H2SO4 纳氏试剂 班氏试剂 碘液 各种pH缓冲液:5.0;6.8;8.0 (二)器具 控温水浴锅(每个实验室3个) 制冰机 电磁灶 不锈钢锅 白瓷板 试管、滴管、移液管(1-2ml) (一)酶的特异性 将上述各试管放沸水中煮3-5min观察并记录 (二)酶的激活剂及抑制剂 观察并记录 (四)pH对酶活性的影响 取3支试管,按下表编号后进行实验。 (1)摇匀后,将各管置于37℃水浴中处理 (2)每隔1min从pH6.8的试管中取出1滴, 反应液 滴于预先滴加稀碘液的白瓷板上,观察其颜色变化。 (3)待颜色呈棕色时,向各管中加稀碘液1-3滴。观察各管颜色,比较各管中淀粉水解的程度,解释pH对酶活性的影响 观察并记录 * * 设计性实验 四、操作步骤 20 20 20 Benedicty试剂 (滴) 各管混匀,置37℃ 水10min 10 10 10 PH6.8缓冲液(滴) — 5 — 煮沸过稀释唾液(滴) 5 — 5 稀释唾液(滴) 10 — — 1%蔗糖 (滴) — 10 10 1%淀粉 (滴) 3 2 1 管号 取试管3支,编号,按下表进行操作 解释结果 现 象 取试管3支,编号,按下表进行操作 3 3 3 碘化钾——碘溶液(滴) 各管混匀,置37℃ 水10min 10 10 10 蒸馏水 — 5 — 1%氯化钠溶液 — — 5 1%硫酸铜溶液 10 10 10 稀释唾液(滴) 10 10 10 1%淀粉 (滴) 3 2 1 管号 解释结果 现 象 10 10 10 稀释唾液(滴) 10 _ _ PH8.0缓冲液 _ 10 _ PH6.8缓冲液 _ _ 10 PH5缓冲液 10 10 10 1%淀粉 (滴) 3 2 1 管号
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