专题1 基因工程(定稿).pptVIP

3.基因表达载体的组成： 它们有什么作用？ a、目的基因 b、启动子 c、终止子 d、标记基因 位于基因的首端,是RNA聚合酶结合位点 位于基因的末端,终止转录 检测目的基因是否导入受体细胞 e、复制原点 目的基因、启动子、终止子不是质粒上固有的，标记基因、复制原点是质粒上固有的。 表达载体在宿主细胞中复制的起点 外源编码蛋白质的基因 ＊如果目的基因是从基因组文库中获取的，因为目的基因本身已含有启动子、终止子，在构建表达载体时，就不需要再加启动子、终止子。 ＊如果目的基因是从部分基因文库中获取的，因为目的基因本身不含有启动子、终止子，在构建表达载体时，就需要再加启动子、终止子。 常用的受体细胞： 有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 （三）将目的基因导入受体细胞—转化 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达，称为转化 1、将目的基因导入植物细胞 ①农杆菌转化法 A、能在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物无感染能力。当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的酚类物质，吸引农杆菌移向这些细胞，这时 农杆菌的特点： B、农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体DNA上。 将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞。单子叶植物常用，成本较高 ③花粉管通道法 ②基因枪法 使目的基因借助花粉通道进入受体细胞，简便经济 2、将目的基因导入动物细胞 显微注射技术：将基因表达载体提纯，用显微注射仪注射到受精卵中 目前采用最多，最有效的方法 3、导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法： 用Ca2+ 处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 氯化钙处理，细胞处于最适摄取和容忍外来DNA的生理状态 （2017高考Ⅰ）38、真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题： （3）若要高效地获得蛋白A，可选用大肠杆菌作为受体，因为与家蚕相比，大肠杆菌具有 ________________________（答出两点即可）等优点。 繁殖快、容易培养 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 受体细胞 农杆菌转化法 体细胞 显微注射法 受精卵 微生物细胞 Ca2+处理法 小结：目的基因导入受体细胞的方法 将目的基因导入植物细胞时，受体细胞可以是体细胞，但是将目的基因导入动物细胞时，受体细胞一定要是 受精卵，为什么？ ＊目的基因进入植物细胞后，可以插入到植物细胞中染色体的DNA上， 形成转基因细胞，就可以使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。 再用这些转基因细胞进行植物组织培养，就可以得到转基因植物了。 ＊目的基因导入动物细胞时，必须导入到受精卵里，使目的基因与受精卵染色体DNA整合，这样细胞分裂时，该基因随染色体的倍增而倍增，使每个细胞中都带有目的基因，使性状得以表达，并稳定地遗传给后代，这样才能得到转基因动物。 (四)目的基因的检测与鉴定 类型 检测内容 方法 结果显示 分 子 检 测 目的基因是否插入染色体DNA（真核生物 ） 是否转录出mRNA 是否翻译出蛋白质 提取转基因生物的DNA，用标记的含目的基因的DNA片段作为探针，使探针与基因组DNA分子杂交 杂交带 提取mRNA，用探针DNA与mRNA分子杂交 提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交 杂交带 杂交带 目的基因是否表达 个体水平鉴定 抗病抗虫的接种实验；基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较 有无抗性及抗性的程度；活性是否相同 （2017高考课标Ⅰ）38、真核生物基因中通常有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。已知在人体中基因A（有内含子）可以表达出某种特定蛋白（简称蛋白A）。回答下列问题： （4）若要检测基因A是否翻译出蛋白A，可用的检测物质是___________________（填“蛋白A的基因”或“蛋白A的抗体”）。 （5）艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献，也可以说是基因工程的先导，如果说他们的工作为基因工程理论的建立提供了启示，那么，这一启示是 _______________。 DNA可以从一种生物个体转移到另一种生物个体 运用基因工程技术，不但可以培养优质、高产、抗性好的农作物及畜、禽新品种，还可以培养出具有特殊用途的动、植物。 基因工程的应用 4 植物基因工程硕果累