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激光扫描共聚焦显微镜的原理和操作;1. 激光扫描共聚焦显微镜工作原理和系统组成;1.2 系统组成:
激光扫描共聚焦显微镜系统主要由:电动荧光显微镜、扫描检测单元、激光器、电脑工作站及各相关附件组成。;实物照片说明;2. 系统的使用;(4)Ar 离子激光器主开关 “ON”
顺时针旋转钥匙 至 “—”预热等待约15分钟,将激光器 [ 扳钮 ] 由“Standby”扳至“Laser run”状态,即可正常使用
(5)打开 [ 电脑开关 ],进入操作系统;2.2 软件的快速使用说明;1 功能界面切换:扫描取图(Acquisition)、图像处理(Processing)、维护(Maintain)(注:Maintain仅供Zeiss专业工程师使用)
2 动作按钮;3 工具组(多维扫描控制);4 工具详细界面;5 状态栏;6 视窗切换按钮;
7 图像切换按钮;8 图像浏览/预扫描窗口;9 文档浏览/处理区域;10 视窗中图像处理模块;激光连接状况检查;眼睛观察/相机/共聚焦LSM 光路切换;透射光控制(Transmitted Light Control)
反射光光闸控制(Reflected Light Shutter)
荧光激发块选择(Reflector);共聚焦LSM 扫描设置
点击“LSM”(ZEN软件界面右上角),系统切换至共聚焦扫描光路:;扫描图像参数设置:;每个通道的精细调节:;三种方法:
(1)“File”菜单下,“Save”
或者“Save AS”。
(2)点击右下角按钮 。
(3)点击工具栏按钮 。
(如图所示)
;另外,通过“File”菜单下的“Export”,也可将图像以其它格式输出。;(1)关闭软件:主菜单“File”——“Exit”,退出共聚焦软件ZEN。
(2)关闭主电脑操作系统、显示器电源。
(3)关闭 [荧光灯电源 ]。
(4)关闭 [电动显微镜电源]。
(5)关闭Ar 激光器:
先将 [扳钮] 从 “Laser run” 扳到 “Standby” 状态;再将 [钥匙] 逆时针从“—”旋转到“O”状态;等待约8-10分钟、激光器风扇停止转动后(切记!),
将 主开关 按钮按到“OFF”。
(6)扫描硬件系统 [ COMPONENTS ]“OFF”
电脑系统 [ SYSTEMS/PC ]“OFF”
主开关 [ MAIN SWITCH ]“OFF”
(7)等 [灯箱] 充分冷却后,再放防尘罩。
(8)如果系统长时间(超过5个小时)不使用,则关闭稳压电源。;(1)打开稳压电源时,应等待2 分钟(???压稳定)后,再开其它开关。
(2)严格遵守[激光器]的开、关流程(详见“2.1、2.4 开/关机顺序”)。
(3)如果使用过[油镜],或者物镜表面较脏,则需用[擦镜纸]擦干净物镜的前表面(清洁液使用无水乙醇和无水乙醚的混合液,混合比例:无水乙醇30%、无水乙醚70%)。
(4)不使用荧光时,不打开[荧光灯]。避免频繁开/关荧光灯。
(5)必须等灯箱充分冷却后,再小心地盖上[防尘罩]。
(6)显微镜可由[TFT触摸屏]控制,使用触摸屏时注意:
①手指保持清洁、干燥状态,并且为了保证他人使用安全,触摸时严禁配戴有可能接触污染物或危险样品的手套;②触摸屏已足够灵敏,不要大力按压触摸屏;③不要旋转、插拔触摸屏。
(7)刻录图像数据资料:应使用刻录光驱刻录,实验前应准备好刻录光盘。
切记:为了防止计算机病毒,严禁在共聚焦电脑上使用U盘、硬动硬盘或
者上网!!!
(8)未经授权,严禁自行安装任何软件!!!
(9)实验室温度应保持在22℃±2℃,湿度40%-60%。
(10)避免空调直接对着显微镜吹风。
(11)整个实验过程应注意保持显微镜周围环境清洁。;参考资料:
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