色谱-质自谱联用.ppt

色谱-质谱联用技术及其应用;授课内容;概述 ;色谱法由俄国植物学家茨维特分离植物色素时采用。 将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带，因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来含义，但仍被人们沿用至今。 ;色谱的原理;固定相和流动相 ;按分离机理分类;;色谱法的流出曲线及有关术语;色谱峰所能提供的重要信息; 二 质谱技术;2.1 质谱的发展;◆ 质谱不属波谱范围；; 质谱仪是通过对样品电离后产生的具有不同的 m/z 的离子来进行分离分析的。 质谱仪包括进样系统、电离系统、质量分析系统和检测系统。 ;;真空系统为早期的维护反馈提供数字化控制;;;电子轰击电离 Electron Impact Ionization, EI 化学离子化 Chemical Ionization, CI 场电离，场解吸 Field Ionization FI, Field Desorption FD 快原子轰击 Fast Atom Bombardment, FAB 基质辅助激光解析电离 Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization, MALDI 电喷雾电离 Electrospray Ionization, ESI 大气压化学电离 Atmospheric Pressure Chemical Ionization, APCI ;电子轰击电离 EI;;有些化合物稳定性差，用EI方式不易得到分子离子； 为了得到分子量可以采用CI电离方式。 ;化学电离 CI;M + CH5+ → [MH] + + CH4 ;场致电离;快原子轰击（FAB） ; MALDI可使热敏感或不挥发的化合物由固相直接得到离子。 ;ESI是近年来出现的一种新的电离方式。它主要应用于液相色谱-质谱联用仪。流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘；从而雾化、蒸发溶剂、阻止中性溶剂分子进入后端检测。;　 ESI是一种软电离方式，即便是分子量大，稳定性差的化合物，也不会在电离过程中发生分解，它适合于分析极性强的有机化合物。 ESI的最大特点是容易形成多电荷离子。目前采用电喷雾电离，可以测量大分子量的蛋白质。;大气压化学电离源(APCI) ;;各种离子源的相对适用性;◆ 质量分析器是质谱仪的核心, 质量分析器的作用是将离子源产生的离子按m/z顺序分开并排列。 ;单聚焦磁场分析器;单双聚焦质谱仪体积大； 色谱-质谱联用仪器的发展及仪器小型化（台式）需要 体积小的质量分析器：;四极杆质量分析器 ;飞行时间质谱仪（Time of Flight MS, TOF-MS） ; ;离子阱质量分析器;2.3.5 检测系统;　 质谱仪的检测主要使用电子倍增器，也有的使用光电倍增管。由倍增器出来的电信号被送入计算机储存，这些信号经计算机处理后可以得到色谱图，质谱图及其它各种信息。 ;2.4 质谱术语 ;m/z;原子;? 分子离子: M+ ·, M - e →M+ · ; ;三 气相色谱-质谱联用技术;GC-MS联用仪器 hyphenated technology of GC-MS;仪器结构;GC-MS得到的信息 ; 得到质谱图后可以通过计算机检索对未知化合物进行定性。检索结果可以给出几个可能的化合物。并以匹配度大小顺序排列出这些化合物的名称、分子式、分子量和结构式等。使用者可以根据检索结果和其它的信息，对未知物进行定性分析。 目前的GC-MS联用仪有几种数据库。应用最为广泛的有NIST库和Willey库，前者目前有标准化合物谱图13万张，后者有近30万张。此外还有毒品库，农药库等专用谱库。 ; 气/质联用是解决复杂样品全组分定性定量分析的有力工具。在分析检测和研究的领域中起着越来越重要的作用，特别是在有机化合物常规检测工作中几乎成为一种必备的手段。 如石化、化工、食品、环保、药物研究、生产、质控以及进出口许多领域的众多环节中都要用到GC/MS；法庭医学中各类案件的现场采集物分析（呕吐液、血液等）、毒药、毒品检验与鉴定；甚至体育竞技运动中，国际公认用GC/MS对运动员进行兴奋剂检测数据可靠。; ;安捷伦液相色谱/离子阱质谱系统;安捷伦1100 系列 LC/MSD: 易懂,易用,图型化的液相和质谱控制及分析软件;LC-MS (四极杆)联用仪器结构示意图;LC-MS (离子阱)联用仪器结构示意图;安捷伦的专利技术 交叉直角喷雾接口;大气压化学离子源(APCI);大气压光离子化源 (APPI);多环芳烃的液质分析结