第五章微来生物的营养b.ppt

1.目的明确 （1）调查和分析微生物细胞组成 （1）加富性选择培养基 （2）抑制性选择培养基 抑制剂： 青霉素（抑制G+细菌） 分离G-细菌 抗生素 氯霉素，链霉素（抑制细菌） 分离酵母菌，霉菌 放线菌酮（抑制酵母，霉菌） 分离细菌，放线菌 结晶紫：抑制G+ 分离G- 染料 胆盐：抑制G+ 分离G- 孟加拉红：抑制细菌、放线菌 分离酵母，霉菌 其它 叠氮化钠：抑制霉菌 分离乳酸菌 10%酚数滴：抑制细菌，霉菌 分离放线菌 用于选择性的物理因素有：温度，氧气，pH值，渗透压等 1. 种子培养基 2. 发酵培养基 3. 测定培养基 4. 菌种保藏培养基 4. 鉴别性培养基（differential media） 指在培养基成分中添加某种能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落中找出目的菌菌落的培养基。 最常见的鉴别性培养基——伊红美蓝乳糖培养基，即EMB（eosin methylene blue）培养基。 EMB用途： 它在饮用水、牛奶的大肠菌群（coliforms）数等细菌学检查和在 E. coli 的遗传学研究工作中有着重要的用途。 EMB培养基中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G–细菌。 在低酸度时，这两种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用。 多种肠道菌会在EMB培养基上产生易于用肉眼识别的多种特征性菌落，因而易于分辨。 例如 E. coli 强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体呈酸性，菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光（似金龟子色）。 （四）根据培养基的使用目的分 种子培养基 发酵培养基 菌种保藏培养基 测定培养基 为了在较短时间内获得数量较多的强壮、有活力的种子细胞而配制的培养基。 种子培养基的要求： 营养丰富； 氮源充足； 由于用量不多，原料可使用较为精制的。 发酵培养基是用于合成发酵产物的培养基。 以获得最大强度的代谢产物为目的。 如果产物分子中以碳元素为主，发酵培养基中 碳源含量就需高些，如果产物分子中氮元素较多，氮源也要相应增加。 发酵培养基用量很大，每天都需几十吨，因此要尽量选用成本较低的原料，选原料时还要考虑它对产品提取、工艺条件的影响。 是用来测定发酵产物的种类和含量的培养基。 一般为合成培养基，组成成分明确、恒定，以保证测定工作的可靠性和重复性。 菌种保藏培养基一般营养不需很丰富。 根据微生物的种类和营养要求加以选择。 三、培养基的配制 配料 溶解 调pH 过滤 分装 灭菌 包扎 摆斜面 贮存 合成培养基的优点： 成分精确 重复性高 价格较贵 配制较繁 微生物生长比较一般 合成培养基的缺点： 组合培养基仅适用于营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等对定量要求较高的研究工作中。 合成培养基的用途： 3. 半合成培养基（semi-synthetic media） 又称半组合培养基，指用天然原料加入一定的化学试剂配制而成的培养基。 举例：培养酵母菌的麦氏培养基、豆芽汁蔗糖培养基，培养真菌的马铃薯蔗糖培养基等。 严格地讲，凡含有未经特殊处理的琼脂的任何合成培养基，因其中含有一些未知的天然成分，故实质上都只能看作是一种半合成培养基。 半合成培养基的特点： 配制方便 成本低 微生物生长良好 适合于大多数微生物的培养。大多数培养基都属此类。 半合成培养基的用途： （二）按培养基外观的物理状态作分类 液体培养基 固体培养基 半固体培养基 脱水培养基 1. 液体培养基（liquid media） 一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模培养微生物。 2. 固体培养基（solid media） 广义：一类外观呈固体状态的培养基。 狭义：在液体培养基中加入凝固剂，即为 固体培养基。 固体培养基为微生物生长提供一个营养表面，微生物在这表面上可以形成单个菌落。 （1）固化培养基 （2）非可逆性固化培养基 （3）天然固态培