黑水银莲花六生物活新.ppt

黑水银莲花生物活性、化学成分初探及其与多被银莲花的比较研究 姓 名：王艳梅 指导教师：张连学 教授 研究目的和意义 银莲花属植物药用历史悠久，主要具有抗风湿功效。该属植物东北地区有13种，其中黑水银莲花(Anemone amurensis (Korsh.) Kom)为本区特有植物。多被银莲花用于治疗风寒湿痹，骨节疼痛，臃肿金疮及静脉炎等症，是活络丹和再造丸的主要原料；黑水银莲花只在记载中有发汗，增强肝肾功能的作用，但并无药理学及临床应用报道。经资源调查，在长白山区黑水银莲花资源量丰富，且经常与多被银莲花（两头尖）混生在一起。 本研究从黑水银莲花和多被银莲花的色谱学及化学成分含量的比较研究入手，获知二者的成分上的差异，进而对黑水银莲花各提取部位进行活性试验及成分分析，同时对黑水银莲花的植物形态、显微结构、生境及遗传性状进行研究，以期为开发应用黑水银莲花这一长白山野生植物资源提供科学依据。 提 纲 一.银莲花属药用植物研究进展  1.银莲花属植物的分类学研究 2.银莲花属植物的主要药理作用 3.银莲花属植物的化学成分 银莲花属植物的分类学研究  银莲花属植物的分组 组1.西南银莲花组 组2.鹅掌草组 组3.草玉梅组 组4.卵叶银莲花组 组5.打破碗花花 组6.钝裂银莲花组 组7.银莲花组 组8.二歧银莲花组 孢粉学研究 1.三沟花粉类型 2.多沟花粉类型(多为6--8沟) 3.散沟花粉类型 4.散孔花粉类型 5.散沟具刺状雕纹花粉类型 6.螺纹状萌发孔花粉类型 银莲花属植物的主要药理作用 1.抗癌作用 2.抗炎作用 3.镇痛作用 4.解热作用 5.镇静作用 6.抗惊厥、抗组织胺作用 7.免疫调节作用 8.抗氧化作用 9.抑菌作用 10.杀虫作用 11.CAMP-PDE抑制活性 12.毒性作用 13.溶血作用 银莲花属植物的化学成分 三萜及其苷类 香豆素类 黄酮类 有机酸类 酯类 氨基酸 挥发油 油脂 微量元素 其它成分 黑水银莲花和多被银莲花的比较研究 TLC色谱比较 石油醚层荧光和显色后各点颜色及其位置 乙酸乙酯层荧光和显色后各点颜色及其位置 TLC 讨论 通过对黑水银莲花和多被银莲花不同提取部位薄层色谱的系统研究比较可知：黑水银莲花和多被银莲花的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇层的薄层色谱在斑点的颜色、大小、多少等方面均有明显的区别。 黑水银莲花与多被银莲花HPLC图谱比较 仪器：Agilent 1100 高效液相色谱仪，DAD二极 管阵列检测器 色谱柱：Diamonsil(TM)C18(250mm×4.6mm，5μm) 柱。 柱温：30℃ 进样量：20μl 流动相：A乙腈 B 0.4%磷酸水溶液，不同溶 液梯度洗脱条件不同。 检测波长 ：203nm HPLC图谱比较 2.乙酸乙酯提取物HPLC谱图比较 3.正丁醇提取HPLC谱图比较 HPLC结果 由3种不同极性提取液HPLC图谱表明，两种银莲花中所含物质成分上稍有不同，含量上有显著差异： 成分上，95%乙醇提取多被银莲花HPLC图谱在25～30min是有明显两个峰出现，而黑水银莲花没有，其他出峰时间几乎相同，证明两种银莲花成分上很相似。 含量上，3种溶剂提取的同一出峰时间的峰面积、峰高均不相同，有的差异很大，证明两种银莲花在相同成分上含量不同。 多糖的测定分析 单体化合物成分提取分离  样品粉末 浸膏 70%乙醇回流提取3次，每次3小时，减压浓缩 悬浮于适量的水中，分批以石油醚，乙酸乙酯萃取 石油醚层 乙酸乙酯层 SiO2柱 ， PE-Acetone， CHCL3-Actone SiO2柱 CHCL3-Actone, CHCL3-MeOH C18H22O2 亚油酸 桦皮酸 薯蓣皂苷元 齐墩果酸 B-谷甾醇 脂肪油的研究 提取 样品粉末，装入圆底烧瓶中，加入石油醚，浸泡24小时，超声10min，于水浴上回流提取1小时，过滤石油醚液层，重复三次，合并石油醚提取液，回收溶剂，得棕黄色半流动的油脂 GC条件 色谱柱：Agilent6890/5973N 填料：HP-5.5%， 柱流速：1ml/min。 柱温：恒温60℃，3min。 程序升温：10/min，升至240℃，保持15min。 苯基-95%甲基聚硅氧烷，载气高纯氦气。