Lp-PLA2(人血浆脂蛋白相关磷脂酶A2)定量检测.pdfVIP

脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA ) 2 和幽门螺旋杆菌抗体 检测及临床应用 杨宜娥 内 容 一、脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2) 1.Lp-PLA2 是什么？ 2. 检测原理、注意事项及结果解释 3. Lp-PLA2与动脉粥样硬化的关系 4. 临床研究 5. 临床应用 二、幽门螺旋杆菌抗体 1.幽门螺旋杆菌的特性 2.幽门螺旋杆菌抗体检测原理 3.临床应用 一、脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2) 检测及临床应用 1. Lp-PLA2是什么？ • 脂蛋白相关磷脂酶A2 ，英文缩写Lp-PLA2 。 • 又称血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH ）。 • 分子量为45KDa 。 • 由成熟的巨噬细胞和淋巴细胞合成和分泌，并受炎 性介质的调节，在血浆中主要与低密度脂蛋白结合。 • 水解ox-LDL-C （氧化修饰的低密度脂蛋白胆固醇） 上的磷脂，生成促炎物质lyso-PC(溶血卵磷脂)和ox- FA(游离的氧化脂肪酸) ，后二者是促炎介质，能刺 激粘附因子和细胞因子的产生，从而导致单核细胞 由管腔向内膜聚集。因此具有促炎症和促动脉粥样 硬化的作用。 康尔克Lp-PLA 定量检测试剂盒特点 2 • 准确、可靠、重复性好 • 灵敏度高 • 简易、快捷，静脉取血2-5ml送检，1.5小时出结果 • 无需空腹，任何时间均可取血 • 性能达到美国同类产品水平 •收费：350元，医保、新农合、 公费医疗均能报销。 2.1检验原理——ELISA 2.2 样品处理 • 样品收集、处理和保存： • 血浆：用EDTA抗凝管取血2ml，1500 r/min离心10 分钟，收集上清液。 • 血清：用普通管或促凝管取血2ml，4℃下放置30分 钟后，1500 r/min离心10分钟，收集上清液。 • 保存: 血浆（清）如不即时检测，则须于-20℃保存 ，并避免反复冻融。 2.3 操作方法 1） 从冰箱中取出试剂盒，室温平衡20min，将标准品离心，1000r/min，1min 2 ）分别加入80ul稀释液（1倍)和20ul待测样品或标准品于反应孔内,混匀,37℃温育20min 3 ）弃去孔内液体，每孔加300ul洗液(1倍），振荡20-30sec后弃去洗液，重复4次，拍干残液 4 ）加入100ul酶标记物，混匀，37℃温育30min 5 ）重复步骤 3 ） 6 ）每孔加入显色液100ul，混匀，37℃温育20min，避光 7 ）加入50ul终止液 8 ）立即用酶标仪在450nm条件下测定各孔OD值 9 ）以OD值为纵坐标（Y ），相应Lp-PLA 标准品浓度为横坐标（X ），制作标准曲线 2 10）根据样品的OD值计算得出样品的Lp-PLA 含量 2 2.4 产品性能指标 剂量-反应曲线的线性 • 用logistic数学模型或其他数学模型拟合，剂量-反应曲线相关系数 （r ）应不低于0