肺炎双球菌转化实验(P58).pptVIP

【例】如果用15N、32P、35S标记噬菌体，让其侵染细菌，产生的子代噬菌体与亲代噬菌体形态完全相同，而子代噬菌体的组成成分中，能够找到的放射性元素为(　　) A．可在外壳中找到15N和35S B．可在DNA中找到15N、32P C．可在外壳中找到15N D．可在DNA中找到15N、32P、35S B 一、肺炎双球菌转化实验（P58） 实验材料分析： 它的菌落光滑(Smooth)，菌体有多糖荚膜，是有毒性的球型菌，能够使人患肺炎或使小鼠患败血病。 它的菌落粗糙(Rough)，菌体无荚膜，是无毒性的球型菌。 R型菌 S型菌 加热杀死的S型菌 R型菌+加热杀死的S型菌 实验一：活体转化： 1928年格里菲思的肺炎球菌转化实验 活的S型菌！ 分离 R型活菌 + S型死菌 S型活菌 转化 （1）为什么无毒的R型活菌可以转化成有毒的 S型活菌呢？ R型活细菌 S型活细菌 杀死的S型细菌中的“转化因子” （2）转化而来的S型活菌的后代也是有毒性的S型细菌又说明了什么？ 转化而来的性状可以遗传，转化因子是遗传物质  如何解释这一现象？ 为什么转化因子没有和S型细菌一起被”杀死”? 说明遗传物质——转化因子比较稳定，不容易变性失活。 （4）转化因子是什么呢？你认为在确定转化因子的实验中，关键的设计思路是什么？你会如何设计这个实验，并预测实验结果？ 关键思路：把各种化合物分开，单独观察，确定唯一变量 。 设计方法：把由S型细菌中分离，提取出的各种成分，单独作用于R型细菌。 （3）该实验有没有证明DNA是遗传物质？该实验的结论是什么？ 该实验不能证明DNA是遗传物质。其结论是加热杀死的S型细菌中有一种转化因子能使R型活细菌转化为S型活细菌。 实验设计：寻找转化因子 [思路] [材料用具] 把S型菌中各种化合物分开，单独观察，确定唯一变量。 R型菌， S型菌的DNA、蛋白质及多糖等，细菌培养基，培养皿 S 型 细 菌 蛋白质 荚膜多糖 DNA 分别与R型活细菌混合培养，观察有无S型细菌产生 第一组 第二组 第三组 蛋白质 多糖 无转化 无转化 1944年艾弗里的离体转化实验 实验二：体外转化： 脂质 RNA …… DNA 无转化 无转化 出现转化现象 DNA的纯度越高，转化就越有效。 DNA+DNA酶 无转化 * 进一步证明：用反证法证明DNA是使R型细菌发生转化的必要条件，使结论更加可靠。而且证明是DNA本身，而不是DNA的碎片或化学组成单位使细菌发生了转化。 结论：DNA是遗传物质，蛋白质不是遗传物质 但是人们对艾弗里的实验结论还表示怀疑？ 因为艾弗里提取的DNA中还含有少量的蛋白质（至少含0.02％）。 为此，1953年赫尔希、蔡斯又设计了噬菌体侵染细菌的实验来证明艾弗里的结论（P49） 二、噬菌体侵染细菌的实验 T2噬菌体属于细菌病毒，营专性寄生生活，它的专一宿主为大肠杆菌。（是怎么寄生的呢？） T2噬菌体的成分中，只有DNA和蛋白质两种物质。 细菌 噬菌体 电子显微镜下的大肠杆菌和噬菌体 噬菌体侵染大肠杆菌的过程 吸附 注入 合成 组装 释放 只把DNA注入到大肠杆菌中 以自身遗传物质DNA为模板，利用大肠杆菌的原料合成新的DNA和蛋白质。 DNA： C、H、O、N、P 1、实验方法： 你会选取哪种元素的同位素来分别标记DNA和蛋白质？ 放射性同位素标记法 蛋白质： C、H、O、N、S 35S 32P 二、噬菌体侵染细菌的实验---赫尔希、蔡斯 蛋白质被35S标记 如何获得35S 或 32P 标记的噬菌体 先用含32PO43-的培养基培养 大肠杆菌，再用噬菌体去感 染这种大肠杆菌 用含35SO42-的培养基培养 大肠杆菌，再用噬菌体去 感染这种大肠杆菌 DNA被32P标记 能不能直接用含有35S和32P的培养基 培养噬菌体来标记？ 32P标记了DNA 35S标记了壳体蛋白 2、实验步骤： ②用已标记的两种噬菌体分别去侵染未标记的大肠杆菌，并且进行适当时间的保温。 二、噬菌体侵染细菌实验 32P标记了DNA 35S标记了壳体蛋白 实验步骤： ③用搅拌器搅拌，然后离心。 搅拌的作用：为了使细菌外吸附着的噬菌体蛋白质外壳与细菌分离 二、噬菌体侵染细菌实验 实验室用的离心机 离心的作用：离心是一种分离混合物的方法，通过离心，被感染的细菌(含有子代噬菌体的细菌)会在下层的沉淀物中，噬菌体的蛋白质外壳质量较小,在上层的上清液中。 二、噬菌体侵染细菌实验