Biacore现场培训课程.pdfVIP

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GE Healthcare Life Sciences Biacore 现场培训教程 1 January 2012 培训内容 • Biacore的原理与应用 • Biacore的基本实验流程 • DEMO实验 • 数据分析 • 维护保养 Biacore的原理与应用 3 January 2012 Biacore:实时、无标记、活性分子互作分析 结合 解离 Biacore实时监控分子相互结合、解离的过程 表面等离子共振原理 (SPR) 入射光源 反射光能量检测器 能量 角度 SPR角度 棱镜 50nm金膜 时间 样品 微流路液相系统 SPR 是一种折光率传感器 响应值反映了SPR角度的改变 响应信号依赖于芯片表面分子的浓度和温度 2 1RU的响应值大致上相当于芯片表面结合物质的浓度改变了1pg/mm (蛋白结合与 CM5芯片) Biacore核心组件 SPR光学组件 IFC 微流路系统 微流控系统 (IFC) 传感芯片 通过表面等离子共振技术(SPR)测定结合 Biacore的典型应用 • 特异性分析 –目标分子与靶分子之间是否发生结合?特异性如何? • 多重结合分析 –哪些分子参与了复合体的形成?顺序是什么? • 亲和力测定 –配体与分析物之间的结合强弱? • 动力学分析 –两分子结合和解离的速率快慢? • 浓度测定 –样品中的目标分子浓度高低? • 热力学分析 –结合强弱、快慢的结构机理是什么? Biacore的基本实验流程 9

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