红细胞计数和血红蛋白测定.pptVIP

①轻度贫血，成年男性Hb＜120g/L， 成年女性＜100g/L； ②中度贫血＜90g/L； ③重度贫血＜60g/L； ④极度贫血＜30g/L。 * 临床意义 * * 红细胞检查 * 红细胞概述 * 72小时 48小时 血红蛋白 (血色素， Hb 或 HGB) 是一种微红色的胶体物质，分子量为 64 458。 是一种呼吸载体，每克血红蛋白可携带氧1.34 毫升．成人红细胞总量约有 600 g 血红蛋白，可携氧 800 毫升。 血红蛋白概述 1.血红蛋白组成 * FEP Fe++ 血红素 HP Hb 2.血红蛋白分子结构及成分 组成 Hb 的多肽链两大类： ①α类链：αζ和θ链； ②非α链：βδγε链。 α链由 141 个氨基酸组成， β链由 146 个氨基酸组成。 * 每个 Hb 分子由 2 条α类肽链和 2 条β类肽链组成，每条珠蛋白肽链含有 1 个亚铁血红素。 * 在人体不同生长时期， Hb 种类与比例不同： * 检测方法 1.手工显微镜法： 2.血液分析仪法： 任务一 红细胞计数 定义： 测定每升血液中所含红细胞数目，用？.？X1012/L表示。 * * 改良牛鲍计数板 计数板 * * 【操作】 1.准备计数板 2.加稀释液：2ml 3.加血：10μl混匀 4.充池 5.计数 6.计算：红细胞数=N/5*25*10*200*106/L * 1．手工法 误差来源：标本 、操作 、器材 、固有误差 2．仪器法 严格按照操作规程 、定期进行室内和室间质控 * 质量控制 1.手工显微镜法 ①血液分析仪的校正 ②白细胞减少时的对照核实。 ③血小板计数受小红细胞干扰时的校正 2．血液分析仪法 方法精确，且操作简便、快速，已广泛应用。 * 方法学评价 成年：男性（4～5.5）×1012/L 女性（3.5～5.0）×1012/L 新生儿： （6.0～7.0）×1012/L * 参考值 * 1．生理性变化 (1)年龄与性别的 差异 (2)精神因素 (3)剧烈体力运动和劳动 (4)气压降低 (5)妊娠中、后期 临床意义 * 2．病理性变化 (2)红细胞增多 1)原发性红细胞增多 2)继发性红细胞增多 3)相对性红细胞增多 (1)红细胞和血红蛋白量减少 1）红细胞生成障碍2）造血原料缺乏 3）利用障碍红细胞4）破坏过多和失血 临床意义 * 医学决定水平 ①高于6.8×l012/L，应采取相应的治疗措施。 ②低于3.5×1012/L为诊断贫血的界限，应继续寻找原因。 ③低于1.5×l012／L应考虑输血 指该项目结果如高于或低于某一个值时就应该采取一定的措施，为患者处理起提供依据的作用。 临床意义 定义：血红蛋白测定是指测定血液中各种血红蛋白的总浓度，用g/l表示 * 任务二 血红蛋白测定 1．氰化高铁血红蛋白(HiCN)测定法 2．其他测定法 十二烷基硫酸钠血红蛋白（SDS-Hb）法 叠氮高铁血红蛋白(HiN3)法 碱羟血红蛋白法 沙利(Sahli)酸化血红蛋白法 溴代十六烷基三甲胺血红蛋白测定法（CTAB）等 * 检测原理 HiCN转化液：即文齐氏液 540 nm 处有一吸收波峰，用分光光度计测定 换算成每升血液中的血红蛋白浓度，或制备标准曲线供查阅。 * CN- 血红蛋白 高铁血 红蛋白 氰化高铁 血红蛋白 高铁氰化钾 540nm 血红蛋 白浓度 吸光度 * 血红蛋白浓度计算公式： Hb(g/L)=A?540HiCN×64458/44000×251 =A×367.7 * * 方法学评价 方法 优点 缺点 HiCN 操作简便、快速(5min)，结果稳定可靠， 试剂容易保存，便于质控，为参考方法 ①KCN有剧毒 ②高白细胞和高球蛋白可致浑浊。 ③HbCO转化慢 SDS-Hb 不用剧毒试剂、无公害，操作简便，呈色稳定，准确度和精度高 ①SDS-Hb消光系数未确定 ②SDS质量差异性大。 ③SDS溶血活力大，不适于同时进行自动化分析 AHD575 同HiCN法，不用剧毒试剂 不便于自动检测、氯化血红素纯度达不到标准 HiN3 准确度和精密度高，试剂毒性低 HbCO转化慢 CTAB 溶血活力强，但不破坏白细胞，适合自动化分析 精密度和准确性低 * * 质量控制 ①成年：男性：120～160g／L； 女性：llO～150g／L。 ②新生儿：170～200g／L。 ③老年(70岁以上)： 男性：94～122g／L；女