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内容 一 胚胎移植 二 配子与胚胎保存 三 动物体外受精 四 性别控制 五 胚胎分割 六 核移植技术 七 转基因动物 ?为了使供体♀多排卵,通常采用超排。 ?国外将常规的胚胎移植称为超数排卵胚胎移植或称为多排卵胚胎移植。 ?目前,用体外生产胚胎技术或克隆技术等方法也可以生产胚胎,扩大了优质胚胎的来源,降低了ET的成本。 ? 1890年剑桥大学Walter Heape从一头纯种安哥拉母兔取出2个4细胞胚胎,移植到一头纯种比利时母兔输卵管上端(用同种公兔交配后3h), 结果生出了4只比利时种仔兔和2只纯种安哥拉仔兔。 这一结果说明早期发育的胚胎更换到另一个体的输卵管(或子宫角)内,如果胚胎的发育阶段和所处的环境条件相适应,它完全可以继续正常发育,并成长为一个新个体。 我国的ET ?ET开始于60年代,主要发展开始于70年代后期,先后在兔、绵羊、牛、马、山羊、猪等动物方面试验成功。 ?目前以牛的ET工作做得最多,主要是高产奶牛和优良肉牛,特别是从国外进口的优良肉牛品种胚胎。 ? 目前,我们广西大力发展奶水平的ET。 ? 目前我国的波尔山羊的ET达国际先进水平。 牛排卵8d内胚胎发育情况及存在部位 ?保存液的组成和培养条件 ?胚胎的室温保存 ?胚胎的低温保存 ?胚胎的超低温冷冻保存 二、意义 1、IVF技术的确立,使在体外进一步研究精子和卵子的受精机理与调控、受精条件与调节变成可能。 2、IVF技术为其他动物繁殖生物技术,如动物克隆、动物转基因工程和胚胎干细胞等研究打下了技术基础。同时也为这些技术的研究提供廉价的材料,如成熟的卵母细胞、受精卵、早期胚胎等。 3、IVF技术可为ET提供充足而廉价的胚胎。尤其是对双胎肉用牛的生产具有特殊的意义。 4、通过IVF技术,使因年老、疾病或伤残而淘汰或死亡的优良母畜仍可继续繁殖后代变成可能。 1、卵母细胞的体外成熟与培养 (1)离体卵巢采卵:是从屠宰母畜的卵巢采集卵母细胞(主要来源) ?卵泡抽吸法 ?卵巢解剖法 二、性别控制的意义 ? 1、可使受性别限制的生产性状(如泌乳性状)和受性别影响的生产性状(如肉用,毛用性状等)能获得更大的经济效益。 ? 2、可增强良种选种中的强度和提高育种效率,以获得最大的遗传进展。 五、应用前景 AI、ET、IVF和性别控制等四大繁殖新技术的相结合,对畜牧业生产的发展将起到无可估量的作用和产生极其深远的影响。 如将性别控制技术应用于动物克隆和转基因技术之中,毫无疑问,整个生物工程将按照人们的意愿更快更有效的发展和应用。 日本克隆的梅山猪 转基因技术:用实验室方法将所需要的目的基因导入动物的受精卵,使外源基因与动物本身基因整合在一起,在动物发育过程中表达,并能稳定地遗传给后代的技术。 在基因组中稳定地整合有人工的外源基因的动物称转基因动物。 转基因动物的应用 1、改善动物生产性能 肉牛“双肌”基因,绵羊多胎基因,GH促进生长 发育。 2、抗病育种 将阻断猪瘟病毒复制的基因转进去→获得抗猪瘟病 毒的转基因猪。 3、生产有特殊经济价值的药用蛋白 作为乳腺反应器(生物反应器) 转移入GH基因的鱼和小鼠 精子分离后的体外受精 (二)胚胎的性别鉴定 鉴定移植前胚胎性别是受精后对后代进行性别选择的一种方法。因为在自然条件下,公母的性比例接近50:50,当选择一种性别胚胎时,必然弃掉另一半的性别胚胎。 胚胎性别鉴定的方法有多种,如性染色质鉴定法、染色体组型鉴定法、雄性特异抗原鉴定法、细胞毒性鉴定法、免疫荧光定法和PCR鉴定法等。 四 胚胎分割 胚胎分割简史 胚胎分割的基本程序 牛胚胎分割的主要用途 五 核移植技术 细胞核移植(NT):是指通过特殊的人工手段,以显微操作、电融合、复合活性化处理等技术为主线,将发育不用时期的胚胎或动物体细胞核,移入到除去单倍染色体DNA的成熟的未受精的卵母细胞中,进行体外重构、体外培养、胚胎移植,从而达到扩繁同种基因型动物种群的目的。 核供体细胞:被移植的细胞核 受体卵细胞质:接受核供体细胞的成熟的未受精卵母细胞质 核供体细胞:①初期胚胎细胞; ②ES细胞; ③各种体细胞:如胎儿成纤维细胞,乳腺细胞,皮肤细胞(耳、成体、胎儿),肌肉细胞,卵丘细胞,内脏细胞(肝、脾、心、肺、肠、舌); ④生殖系列细胞:PGCs、精母细胞、足细胞和精巢细胞。 细胞核移植的方法 体细胞核移植 胚胎细胞核移植 核移植技术程序 核移植的应用前景 (一)扩大优良畜种和稀有动物的数量 (二)提高转基因动物效率 (三)核
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