第一章血液标本采集和制片.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * 四、血标本的运送、保存与处理 （三）血液标本拒收 溶血、容器不当、标本量不足、转运不当、申请单标识不清、标本污染或破损均要拒收 （四）血液标本保存 按要求分为室温保存、冷藏保存、冷冻保存 立即送检标本：血氨、血沉、血气分析酸性磷酸酶、乳酸等。 （五）检测后标本处理 原则：将危险减至最小、对环境危害减至最小 第二节血液标本采集质量保证 一、采血环境要求与生物安全 1、环境要求：环境应舒适、宽敞、明亮通风、有足够的采血窗口。 2、生物安全：防止交叉感染，履行环境消毒。 血液标本的采集是分析前质量控制的重要环节之一 第二节血液标本采集质量保证 二、标本的采集的一般要求 （一）检验申请单 （二）标本采集和处理具体要求 患者告知、患者准备说明书、标本采集类别和数量、标本采集日期和时间、标本处理要求、标本采集人员、标本采集器材和安全处理。 （三）标本信息完整性与接收 对特殊标本处理、急危重病人标识、规定时间内送检、注意物理条件对标本影响、标本归档记录、接收记录等 第二节血液标本采集质量保证 三、血液标本采集及检测结果的影响因素 1、患者生理状态和饮食的影响 标本采集时的活动情况、精神状态、饮食、吸烟、等都影响结果(见p12表1-5) ２、药物对检验结果影响: ①影响反应系统待测成分的物理性质； ②参与检验化学反应； ③影响机体生理功能和细胞活动的代谢； ④对器官的药理活性和毒性作用。 第二节血液标本采集质量保证 3、采血操作对检验结果的影响 （1）采血的时间 应尽可能上午9时前空腹采血，应尽可能检查和治疗前采血 （２）采血部位 1)皮肤采血：避开炎症、化脓 、冻伤等处； 2)静脉采血: 选择大而浅表的大血管。 第二节血液标本采集质量保证 3、采血操作对检验结果的影响 （3）采血体位：直立比仰卧血液浓缩，细胞计数和大分子增高。 （4）止血带压迫时间：不超过1min，过长将引起血液浓缩，成分改变，影响结果。 第二节血液标本采集质量保证 4、其他 （1）输液： （2）避免溶血： （3）抗凝剂对标本影响 （4）低温保存对标本的影响 血液分析仪测定抗凝血标本不宜低温保存，低温可使血液成分及细胞形态发生变化；室温保存时间不能超过6h，冰冻标本不宜反复冻融，解冻后应完全融化、混匀后应用。 第三节 血涂片制备和染色 一、血片制备 （一）载玻片的清洁 １、新玻片用1mol/L（10％） Hcl浸泡24h→清水彻底冲洗→烤干后备用。 ２、用过的玻片用肥皂水煮沸20min→趁热将血膜刷洗干净→清水反复冲洗。 第三节 血涂片制备和染色 （二）制血片： 推片法 于载玻片1/3与2/3交界处加绿豆大血1滴→ 左手拇指与中指持载玻片(血滴靠中指端) → 右手持边缘平滑的推片,从血滴前方接触血液→使血液散开成一线 →以推片与载片保持25～30度夹角 →向前(母指方向)推动→形成血膜 (三) 良好涂片标准 (1)呈头、体、尾分明的舌形 外观 (2)血膜均匀一致，厚薄适宜 (3)两边留有空隙(较大细胞常在边缘) 体 尾 体 头 尾 (1)血滴大小(2)推片与玻片之间角度(3)推片速度 二、 血涂片染色 常用染色方法有： 瑞氏染色法、姬姆萨染色法、瑞姬氏染色法 (一)瑞氏染色法（Ｗright) 【原理】 1、瑞氏染液组成：瑞氏粉+甲醇 (1)瑞氏粉的组成： 美蓝的氯盐 + 伊红的钠盐 +水 → 瑞氏粉沉淀(ME) 瑞氏粉不溶于水，而溶于甲醇 二、血涂片染色 (2)瑞氏粉的性质： 是一种中性盐（伊红E－、美蓝M＋），难溶于水，可溶于甲醇并解离 (一)瑞氏染色法（Ｗright) 【原理】 1、瑞氏染液组成： (1)瑞氏粉的组成： ME(瑞氏粉)＋甲醇→M＋+ E－ -→ 瑞氏染液 美蓝氧化后-→天青(紫红色) 二、血涂片染色 2、甲醇作用： ①固定血膜片（具强大脱水力）,防止细胞溶解；增加染色效果；使细胞粘附于玻片 ②溶解瑞氏粉，起溶剂的作用：过多瑞氏液或染色过久反可使细胞不着色。 (一)瑞氏染色法（Ｗright) 【原理】 1、瑞氏染液组成： 二、血涂片染色 3、细胞对染液的反应： 染色过程中既有物理吸附作用又有化学亲和力作用（各类细胞和细胞的各种成份, 化学性质不同，→对染液亲