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第一章 血液检验 BLOOD ROUTINE TEST 血液生理概要 1、血液的组成 有血细胞(45%)和血浆(55%) 两部分组成。 2、血液的主要理化性质 (1)血量 占体重的7-9%,成人约4-5L; (2)颜色 来自血红蛋白 (3)PH值: 7.35~7.45 3、血液的功能:参加机体呼吸、运输、防御、协调体液渗透量和维护内环境。 3、器材: ①注射器:不同型号(5~10ml) ②容 器:硅化处理玻璃试管或者塑料试管 ③压脉带 ④消毒碘酒棉球 4、注意: ①注射器和容器必须干燥 ②抽血不宜过快,以免产生气泡或溶血 ③要拔掉针头再徐徐注入容器 ④若遇病人晕厥时勿惊慌,可采取: 平卧休息 嗅芳香氨酊 指按“人中”“合谷”等穴位 真空采血法(负压采血法) 优点: ①封闭:减少医务人员感染 减少容器间转移 减少交叉污染 保护环境 ②减少溶血 ③保证标本质量 (二)毛细血管采血法 1、适用:需血微量的检查 2、部位:手指、耳垂、拇指、足跟 WHO推荐:左手无名指 指端内侧 3、器材: ①采血针:一次性采血针 三棱针 专用采血针 ②75%酒精棉球和消毒干棉球 ③微量吸管(20微升) 4、优缺点: 优点:方便,快捷 5、注意: ①穿刺部位消毒酒精干后方可穿刺 ②烧伤病人应选择皮肤完整处采血 ③必须一人一针 (三)动脉采血法 1、适用:用于血气分析 2、部位:股动脉等 3、器材:专用采血器 4、注意:采血后立即封闭针头,避免与 空气接触,及时送检,最好在 10分钟内检测。 (四)抗凝剂选择 抗 凝——用物理或化学方法除去或抑制血液中的某 些凝血因子的活性,阻止血液凝固。 抗凝剂——能够阻止血液凝固的物质。 2)应用: ①适用:多项血液学检查, 尤其是血小板计数 特别适用于 全血细胞分析 血细胞比容测定 ②不适用:凝血象检查和血小板功能检查 因为:EDTA影响血小板聚集 ③用量:1.5-2.2mg/ml血 ④EDTA-K2,EDTA-K3应用注意: EDTA-K3可使RBC皱缩,ICSH建议用 EDTA-K2 作血细胞计数抗凝剂 2、肝素 (1)抗凝原理:抗凝机制复杂 ①与AT-Ⅲ结合抑制凝血活酶的形成 ②抑制血小板聚集与释放反应 ③灭活丝氨酸蛋白酶,抑制凝血酶形成 (2)应用: ①适用:适用于绝大多数检查 (不影响细胞体积,不易溶血) 尤其是细胞培养和红细胞渗透脆性实验 ②不适用:不适合血液学一般检查 因为:▲易引起白细胞聚集 ▲血涂片罗氏染色有蓝色背景 ③用量:15±2.5 IU/ml血 3、枸橼酸盐 (1)抗凝原理: 与钙离子结合成螯合物,从而阻止血液凝固。 (2)应用: ①适用:血沉测定 凝血功能测定 输血保养液 ②不适用: ③用量: 0.105M枸橼酸钠,比例9:1 二、血细胞涂片制备和染色 二、血细胞染色 (一)瑞氏染色法 (Wrights stain ) 1 .瑞氏染料(复合染料) 酸性染料伊红 (E-) 碱性染料亚甲蓝 (M+,又名美蓝) 美蓝容易氧化为一、二、三甲基硫堇等次级染料 (即天青) , 甲醇的作用:①溶解美蓝和伊红,解离为 M+和E- ; ②脱水作用,固定细胞形态,增强染色效果。 (一)瑞氏染色法 2 .染色原理是染料透入被染物并存留其内部的一种过程, ①物理的吸附作用, ②化学的亲和作用, 嗜酸性颗粒——碱性——与酸性染料——粉红色; 细胞核蛋白——酸性——与碱性染料——紫蓝色或蓝色; 中性颗粒——等电状态——与伊红和美蓝——染淡紫红色。 3 pH 值的影响: 染色所用玻片必须清洁,无酸碱污染。 配制瑞氏染液必须用优质甲醇, 稀释染液必须用缓冲液, 冲洗用水应近中性。 新鲜配制的染料偏碱,
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