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肝脏干细胞移植联合TIPSS治疗肝硬化 一、干细胞的概念 干细胞是能够长期存活,具有不断的自我繁殖能力和多向分化潜能,几乎存在于所有组织中的原始细胞。按其来源分类 ①胚胎干细胞(embryonic stem cell); ②成体干细胞(somatic stem cell); ③诱导多能干细胞 ips(Induced pluripotent stem cells) 干细胞是不均一的细胞群体,缺乏直接的形态学特征。其表面无血型分子、无MHC分子,故不需要配血型及HLA配型。 二、干细胞的特点(1) 干细胞长期存活不断地自我繁殖的特性: 干细胞不论在体内还是体外培养都能表现为长期存活,不断地自我繁殖。只有长期存活,才能用于临床治疗。 二、干细胞的特点(2) 可塑性: 成体干细胞,可以跨系跨胚层分化为所有的组织细胞类型的特性,称为可塑性。这是成体干细胞能够治疗各种细胞损伤性疾病的理论基础。 二、干细胞的特点(3) 化学趋向性: 在病理情况下,成体干细胞向病理部位迁移,成为病理部位的前体细胞,并分化为终末成熟细胞。不仅可以利用干细胞来修复组织的损伤,而且可以把它作为多种疾病细胞替代治疗和基因治疗的理想载体。 三、干细胞用于临床面临的几个主要问题(1) 干细胞能有效治疗各种细胞损伤性疾病已经得到全世界的认可,但是这项技术要想在临床工作中推广实施还要解决下面几个主要的问题: 三、干细胞用于临床面临的几个主要问题(2) 1.如何获得干细胞; 2.选择哪一类干细胞; 3.是否能够通过伦理学审查; 4.所选择的干细胞是否具备生物安全性; 5.干细胞的有效数量、干细胞的存活率; 6.获得的干细胞能否满足治疗的要求; 四、目前三种干细胞的比较(2) 四、目前三种干细胞的比较(3) 从前面示意图和表格的看出:成体干细胞来源广泛,容易获取,处理简单,不存在伦理学问题,安全性高。具有无可比拟的优势! 五、骨髓、脐带血、外周血的比较(1) 六、我国肝病现状(1) 据资料统计,我国病毒性肝炎发病率达 113. 2/10万人,乙型肝炎病毒感染约1.2 亿,丙型肝炎及酒精性肝炎、脂肪性肝、药物性肝炎、自身免疫性肝炎等发病率也在不断增加,约30 %的肝炎最终因肝功能衰竭而死亡,慢性肝炎中,肝硬化失代偿期发生率为3 % , 5 年累计发生率约16 % ,失代偿期肝硬化的5 年病死率为70 %~86 %。 七、目前肝硬化主要治疗方法 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(1) 意义: 临床证实,干细胞移植能够显著促进终末期肝病患者肝功能恢复,治疗安全有效,在当今原位肝移植供肝紧缺的情况下,可以部分代替肝移植治疗,值得临床上大力开展。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(2) 适应症: 失代偿期肝硬化,肝功能 Child-pugh分级A、B、C级。 急性、亚急性重型肝炎恢复期。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(3) 禁忌症: 原发性肝癌; 重型肝炎急性期; 有心、脑、肾等严重疾病以及衰竭 状态病人。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(4) 程序: 干细胞来源: 采集胎盘脐血,脐血要求:足月产妇,留脐血60-100ml存放脐血袋内,放置2-8℃保存(12小时)。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(5) 干细胞分离注意事项: 全部分离操作必须在万级洁净实验室、局部百级超净工作台内完成,以保证整个分离过程的无菌操作;必须保证在操作过程中使用的其他容器及所有接触脐血的物品无菌! 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(6) 干细胞分离注意事项: 由细胞分离专业人员按试剂盒说明书要求操作分离干细胞,储存在专用试管中,在2-8℃容器内,不超过1小时,留取2ml做细胞计数、CD34检测、细菌培养、内毒素检测。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(7) 干细胞分离原理: 主要是利用改变细胞膜电位(离子浓度)产生的血沉现象,采取负收集混合法分离并收集细胞。 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(8) 干细胞的检测: 干细胞终制品有核细胞存活率必须大于96%,有核细胞收集率大于85%(我院有核细胞收集计数大于2.0*108 ). 八、干细胞移植在肝脏疾病中的应用(9) 病例选择: 全部为肝硬化患者,其中乙肝患者30例,丙肝患者2例,特发性患者1例,酒精性患者1例,共计34例。入院时Child C级28例,B级5例,A级1例。 八、干细胞移植
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