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血培养阳性时间-金黄色葡萄球菌 如何分析血培养凝固酶阴性葡萄球菌? University Hospital of Base,2003-2007 3060阳性血培养,654CNS,粒缺患者除外 232 (35%)真正BSI,422 (65%)污染 BSI由感染科医生判断,至少一份血培养CNS阳性,有感染临床表现 SIRS: 体温38C or 36C; 心率90/min; 呼吸 20/min; 白细胞12 or 4 G/L or 10% 未成熟中性粒细胞 32%患者有1瓶以上CNS阳性,BSI68 %,污染12% (p 0.001) 没有SIRS症状:BSI 5%,污染29% (p 0.001) Clin Microbiol Infect. 2012 online 单瓶血培养CNS的BSI和污染患者区别 Clin Microbiol Infect. 2012 online 单瓶血培养CNS阳性BSI与临床症状相关性 Clin Microbiol Infect. 2012 online Clin Microbiol Infect. 2012 online 降低血培养污染率--严格消毒 血培养瓶消毒:70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,待干60秒。或70%异丙醇消毒干燥 皮肤消毒: 三步法 70%酒精擦拭静脉穿刺点 30秒 1%?2%碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒:从穿刺点向外画圈消毒,直径3cm 70%酒精脱碘 一步法 葡萄糖酸洗必泰作用30 s,或70%异丙醇消毒后自然干燥,但不适用于2个月以内的新生儿。 急诊血培养污染率与工作量相关 The University of Michigan Health System急诊 血培养大多数由采血员采集,其次为护士和医生 采血员:病人= 1:9,重症区护士:病人= 2:3,其它区域护士:病人=1:4 年病人量82521人,采集血培养者7586人 11.4%至少1瓶阳性,病原菌阳性率8.0%,污染率3.7% 多套培养患者阳性率7.4%,单套培养阳性率5.1%(p0.001),污染率无显著差别(2.2% vs. 2.6%) Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 急诊小时工作量 Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 繁忙时血培养污染率增加 OR=1.23 OR=0.93 Schuyler Halverson, et al. JCM. 2013 online 抗菌药物治疗与血流感染死亡率 死亡率 Chest 115 (2): 1999 血培养三级报告制度 血培养 阳性 终报告 革兰染色 传种培养 初步报告 (直接药敏) 鉴定菌株 电话报告 鉴定+标准药敏 血培养结果回报对治疗的影响 A = Appropriate Therapy(正确治疗) I = Inappropriate Therapy(不正确治疗) Clin Infec Dis 24:584-602, 1997 血流感染快速分子诊断 分子诊断不受抗菌药物使用的影响 血培养阳性后分子诊断 直接使用血标本进行分子诊断 快速 但不能提供药敏结果 血培养阳性瓶分子鉴定 Antigone Kotsaki, et al. Expert Opin. Med. Diagn. 2012, 6(3):209 阳性血培养-基于PCR的检测 PCR特异性检测 病原特异性PCR 特定耐药基因检测:葡萄球菌mecA, 肠球菌van 细菌载量:肺炎链球菌自溶毒A基因lytA拷贝数 广谱检测:PCR扩增特定靶位 多态性分析 测序 后续基因检测 种特异性real-time PCR Expert Opin. Med. Diagn. 2012, 6(3):209. Curr Opin Infect Dis.?2011, 24(2):137 qPCR鉴定血培养阳性瓶中铜绿假单胞菌 Target:ecfX gene 血培养系统:BacT/ALERT,87瓶FA、13瓶FN,涂片均显示G-b 对照方法:氧化酶,API 20E DNA提取:0.5ml肉汤,离心后加裂解液,水煮法 定量PCR: 扩增:Oligonucleotide primers 基因特异性检测:fluorescent-labeled hybridization probes,152bp fragment Annal Clin Microbiol Antimicrob 2010, 9:21 qPCR鉴定血培养阳性瓶中铜绿假单胞菌 33瓶pae,敏感性和特异性均为100% 1瓶kpn+pae,由于pae (20CFU/ml)≤kpn (108CFU/ml),PCR(-) 检测限:将ATCC27853 e

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