液相色谱仪的维护与常见故障.pptVIP

液相色谱仪的日常维护与常见故障排除 一 液相色谱仪的 日常维护 储液器 使用HPLC试剂/溶剂，含缓冲盐的流动相过0.45μm膜除去微粒物质;更换流动相时,应彻底清洗，防止交叉污染。 定期清洁储液器及附件，防止长微生物。 输液泵 密封垫易损坏引起故障，每天实验结束一定要认真冲洗泵,注意防止堵塞,使用缓冲盐流动相时,更要小心。 使用HPLC级试剂,注意泵压力不要太高,要适当调整压力,一般压力上限在10-20MPa，下限为0.5MPa，注意防止因泵堵塞造成压力过高损坏柱塞杆或烧坏电机 。 进样器 停机前一定冲洗干净进样器内残留的样品或缓冲盐，防止样品和无机盐沉积造成进样阀转子面磨损或堵塞。 注射器最好使用仪器自配尖头、平头针，不要用其它仪器的。 柱—防止柱性能下降 1 溶剂的化学腐蚀性不能太强； 2 避免颗粒物在柱头沉降； 3 柱压不能太高，防止冲击太大； 4 流动相pH值小于7时，最好用大粒度同种填料的予 柱； 5 柱头加滤片（烧结不锈钢), 需要时加保护柱； 6 经常清洗柱； 7 长时间不用时要保存好,一定要洗去缓冲盐,加入大 于10%有机溶剂，将柱两端拧紧,保持柱填料湿润。 检测器 保持清洁，每天用后与色谱柱一起清洗； 不定期用强溶剂反向冲洗检测器； 使用脱过气的流动相，防止气泡滞留池内； 检测器灯有一定寿命，不用时不开灯。 记录器数据处理系统 记录仪: 热敏式打印头要注意记录纸的质量,开机前注意检查走纸部件,不要卡纸. 色谱工作站: 防止网上病毒损坏软件. 二 常见故障的排除 1、储液器 脱气不充分(噪声大，出毛刺) 用He脱气, 真空脱气, 超声脱气, 加热回馏脱气,(混合流动相不宜) 1、储液器 流动相供给不畅，泵压力不稳 流动相接近用完 过滤器堵塞（有颗粒，长霉） 流速过高,阻力大,造成空化现象.解决的办法是:降低流速;换大孔过滤器;加大管路内径;抬高储液器. 1、储液器 储液器或流动相被污染 产生有规则的噪声； 基线上升，梯度洗脱出鬼峰； 原因: 溶剂质量差（含杂质多）； 配流动相的玻璃器皿不合格,微生物影响； 配制流动相的操作不当（过滤、脱 气、搅拌). 2、输液泵 单向阀 a.球和阀座粘在一起，堵死，打不出溶剂，(缓冲盐流动相) 用高质量的溶剂冲洗，不同极性溶剂冲洗,如水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷…，更换新单向阀。 2、输液泵 b. 球和阀座密封不严，压力不稳，气泡进入阀中，紧贴在阀体内，使球难以返回阀座，引起倒流，压力和流速变化大，可能有小晶体颗粒。 清除气泡的办法：打开排液阀，大流量冲洗，用脱过气的甲醇冲洗，一般可解决问题。 3、进样系统 b. 堵塞, 样品打不进去。 样品管堵塞：环管用反冲法或超 声清洗排除（或换新管). 3、进样系统 c. 注样孔 a) 装样时针头周围渗漏：孔道堵塞，或者放空管和样品管太细，阻力太大；针头密封管规格不对，针头太细。 3、进样系统 c. 注样孔： b)注射孔渗漏：放空管有虹吸现象，转子密封面上孔之间有磨损。为防止虹吸,放空管末端应在放空 瓶液面以上,更换磨损的转子. 3、进样系统 c)样品滞留 阀在进样位置停留时间不够。 要求停留时间至少应让流动相流过的体积是环体积的10-20倍。 (一般是在下一针进样前才将阀扳到装样位置) 3、进样系统 c)样品滞留 残留样品留在样品环中或注射器中，或从放空管中虹吸回来,污染下一个样品.此时可用5-10倍的流动相或新样品冲洗注射孔和注射器,若是虹吸,应加限制管。 3、进样系统 c)样品滞留 管路接头有死体积滞留样品，很难冲洗干净,此时应检查装配情况，确定是否需换新配件。 3、进样系统 a. 样品瓶不配套 瓶小——针弯、折断 瓶大——样品少，抽不上样 瓶破碎 更换合适的样品瓶。 3、进样系统 b. 注意样品瓶隔垫，防止污染。 c. 进样器针头堵塞（样品、缓冲 盐、隔垫碎片、针头本身)， 可用溶剂清洗，金属丝疏通， 或换新针头。 3、进样系统 d. 样品滞留：空白溶剂出色谱峰. 加倍清洗，或调整样品瓶顺序，（从低浓度开始，高浓度放后 面）或在样品瓶前放清洗液瓶. 4、色谱柱 1)塔板数下降 a. 样品处理不合适，选择适当的样品净化 方法，选择合适流动相。 b. 柱头塌陷，填装修补。