不同剂量地塞米松对液压冲击伤脑水肿aqp4表达的影响外科学专业论文.docxVIP

材料与方法 材料与方法 11 结果多日木 151) 附图 17 附表 ．20 讨论 22 小结 23 参考文献 24 第二部分不同剂量地塞米松对大鼠液压冲击伤脑水肿AQP4 表达的影响 前言刖舌 ．27．27 材料与方法 28 结果 3l 附图 34 附表 ．．47 讨{仑 ’ 51 小结 52 参考文献 53 结论 55 综述水通道蛋白4在创伤性脑水肿中的作用研究 56 致谢 67 个人简历 ．68 中文摘要不同剂量地塞米松对液压冲击伤脑水肿 中文摘要 不同剂量地塞米松对液压冲击伤脑水肿 AQP4表达的影响 摘 要 第一部分 大鼠液压冲击伤神经功能评分与AOP4表达的关系 目的：建立液压冲击脑损伤动物模型，观察神经功能评分和AQP4 的表达规律，探讨神经功能评分与AQP4和脑水肿的关系。 方法：雄性成年SD大鼠56只，体重250．3509，随机分为3组：空 白对照组(NC组)4只i假手术组(SO组)4只，损伤组(TBI组)48 只，再随机按伤后1h，6h，12h，24h，3d，7d六个时间点分为6组，每组8只． 按文献制作液压冲击伤动物模型。SO组动物常规麻醉开颅，但不进行液 压冲击，NC组不进行任何处理。 NC组和SO组于术后，TBI组于术后第1h、6h、12h、24h、3d和7d 各时间点先行神经功能评分，再10％水合氯醛过度麻醉，断头处死，开颅 取脑，行HE染色和免疫组织化学染色方法检测AQP4。从损伤区前缘取 100mg左右脑组织应用干湿重法测脑组织含水量。损伤区后缘脑组织用于 免疫蛋白印迹(Western Blot)检测AQP4蛋白表达。 结果： l 动物一般状况：大鼠在液压冲击伤后均立即出现前肢抱握屈曲、肌张力 增高、竖毛、弓背、心率增快等表现，且可出现呼吸暂停，持续时间约(15 ±2)s，一般可自行恢复呼吸。随后昏迷、反射减弱。清醒后精神萎靡不 振，活动减少。 2神经功能评分：TBI组与SO组比较，在伤后各个时间点评分降低 (PO．05)；TBI组在伤后1h开始评分逐渐升高，在伤后12h出现拐点， 到伤后24h时下降至最低值，于伤后3d时有所升高，但仍低于12h，随 后逐渐升高。 3 组织学观察：损伤灶周围脑组织于伤后6h开始出现细胞水肿，伤后 12h细胞水肿程度较前明显，伤后24h水肿范围进一步扩大，水肿程度达 到高峰，并有胶质细胞的增生，伤后3h仍可观察到周围明显水肿，但较 中文摘要24h时有所减轻，胶质细胞比之前增生明显。伤后7d水肿基本减退，胶 中文摘要 24h时有所减轻，胶质细胞比之前增生明显。伤后7d水肿基本减退，胶 质细胞仍增生明显。 4脑水含量：自伤后6h[(79．21±1．09)％]脑组织含水量开始增加， 24h[82．19±O．97)％1时达到最高，持续至3d[(81．74+1．69)％】，然后开始下 降，7d时[(80．45±O．7)％]基本恢复。 5 免疫组织化学：脑组织AQP4蛋白主要表达于星形胶质细胞和室管膜 细胞内，尤其富集于与毛细血管和软脑摸直接接触的星形胶质细胞足突 中。结果显示损伤组水肿脑组织AQP4于伤后6h开始增3n(o．1 738+0．076)， 24h达最高峰(O．1912+0．085)，持续至3d(O．1788+0．099)后开始下降， 但7d时仍高于SO组。 6 Westem Blot：TBI组在水肿脑组织AQP4蛋白表达在伤后6h开始增 高(0．3896+0．098)，在伤后12h(0．6471+0．0469)持续增加，于24h (O．7211士0．0784)达最大值，持续到3d(0．5617+0．0726)开始下降，至 7d仍高于正常脑组织。 7神经功能评分与脑水肿、AQP4的相关性：TBI组在伤后12h到7d 之间神经功能评分与脑含水量呈负相关(F．0．615，P0．001)，与AQP4 蛋白表达也呈负相关(F．0．605，P0．05)。脑含水量与AQP4蛋白表达呈 相关性(FO．84，P0．05)。 结论：液压冲击伤大鼠的神经功能障碍与继发性脑水肿密切相关， 其中AQP4通过介导脑水肿加重神经功能损伤。 关键词：神经功龇Bw；脑水肿；脑损伤；AQP4；冲击伤。 第二部分 不同剂量地塞米松对大鼠液压冲击伤脑水肿 ^0P4表达的影响 目的：建立液压冲击脑损伤动物模型，应用不同剂量地塞米松干预， 采用免疫组织化学、Western Blot、RT-PCR技术，从蛋白子和基因不同水 平动态观察AQP4及其mRNA的表达变化，探讨不同剂量地塞米松对液 压冲击性脑水肿AQP4表达的影响，并寻找临床应用的最佳剂量。 中文摘要方法：健康成年雄性SD大鼠200只，体重250．3509，随机分为4 中文摘要 方法：健康成年雄性SD大鼠200只，体重250．3509，随机分为