抗体纯化试剂盒.PDF

BeaverBeads™ Protein A （or A/G )Antibody Purification Kit 变化较大）；然后根据所选免疫磁珠的抗体结合能力（见免疫磁珠相关产品列表或者产品组成的 Antibody 抗体纯化试剂盒 Capacity 数据），计算免疫磁珠的大概用量，免疫磁珠用量过多或过少均影响抗体纯化的效果，建议免疫磁 产品简介 珠用量的最大载量应为样品抗体含量的80%~ 100%。 BeaverBeadsTM Protein A （or A/G ）抗体纯化磁珠系列产品是利用海狸专利的蛋白偶联技术使 以下操作步骤按照纯化抗体，取用 100 µL Protein A 抗体纯化磁珠为例进行详细描述。操作者可以参照 Protein A （or A/G ）共价包被到NHS 活化的超顺磁性微球表面。与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相 以下步骤中各种缓冲液的用量及容器大小，按比例调整实际操作中各成分的用量。 比，该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率，洗脱条件更均一，一步纯化即可从血 1. 样品处理：取抗体含量约为0.1~0.15 mg 的样品置于新的1.5 mL EP 管中，加入抗体结合缓冲液 （②） 清样品中分离出纯度大于 90%的抗体。本产品为纳米级磁性微球，具有超大比表面积，可大幅度缩短抗 至总体积为500 µL （如样品体积大于500 µL 则无需加入），混合均匀。 体吸附所需的时间，熟练操作可在 15 min 内完成抗体吸附过程，30 min 内完成抗体纯化流程。抗体纯 2. 磁珠预处理：将抗体纯化磁珠 （①）漩涡振荡30 s，使磁珠充分重悬；取100 µL 磁珠悬液置于另一新 化磁珠试剂盒配有经过优化的预制缓冲液，为抗体纯化实验提供了最佳的反应条件，增强了抗体纯化实 的1.5 mL EP 管中。对磁珠悬液进行磁性分离（将EP 管放置于磁性分离器）上，使磁珠吸附在管壁至 验的稳定性。 溶液澄清；该操作描述以下省略，弃上清液。从磁性分离器上取下EP 管。用抗体结合缓冲液 （②）洗 本产品可重复使用，适用于血浆、腹水、组织培养上清液等样品中的抗体纯化，也可用于抗体固定 涤2 次，弃上清液，管中磁珠可直接用于抗体分离）。 及其它相关研究。用户可根据目标抗体的种属来源及亚型选择磁珠的类别，Protein A ，Protein A/G 磁珠 3. 抗体吸附：在步骤 2 预处理的磁珠管中加入步骤 1 处理的样品溶液，漩涡振荡均匀，在室温下（约 与不同抗体的亲和性比较参见附表1。 25 ℃）置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转EP 管，促使样品和磁珠充分接触并吸附，翻转约 15 min 后 产品信息 进行磁性分离，移弃上清液。 本操作说明书的产品组成是以抗体纯化磁珠试剂盒（货号 20102-1，20202-1）为例进行详细说明， 4. 磁珠洗涤：向EP 管中加入 1 mL 抗体结合缓冲液 （②），振荡重悬磁珠后进行磁性分离，移弃上清液； 适用于BeaverBeadsTM Prote