第3章--细胞生物学研究方法(翟中和第四版).pptVIP

（七）拟南芥 (Arabidopsis thaliana) 十字花科的植物， 广泛用于植物遗传学、发育生物学、细胞生物学和分子生物学的研究 二、突变体制备技术——RNA水平 RNA 干扰（RNAi） 二、突变体制备技术——DNA水平 基因敲除(knock out) /content/56/12/972.full 三、蛋白质组学 (proteomics) 技术 本章小结 细胞形态观察所用不同类型显微镜的用途、基本原理及其样品制备方法 细胞组分的分离、分析方法 细胞培养与细胞工程技术 细胞及生物大分子的动态变化观测技术 模式生物 图片来源：/study-cell-biology.html * 图片来源：/wiki/File:Microscope_(PSF).png 1. eyepiece 2. focus adjuster 3. objective 4. platform 5. mirror * 图片来源：/repeat-after-me-scientists-do-science-politicians/microscope/ * * 这种照明的光束来自物体的上方通过物镜后照射到被检物体上，这样物镜又起着聚光镜的作用。这种照明法是适用于非透明物体 用快速低温冷冻法，在液氮或液氦中将样品迅速冷冻，然后在低温下进行断裂。这时冷冻样品往往从其结构相对“脆弱”的部位（即膜脂双分子层的疏水端）裂开，从而显示出镶嵌在膜脂中的蛋白质颗粒。经过一段时间冰的升华（又称蚀刻），进一步增强图像“浮雕”样的效果。再用铂等重金属进行倾斜喷镀，以形成对应于凹凸断裂面的电子反差。接着，用碳进行垂直喷镀，在断裂面上形成一层连续的碳膜。最后用消化液把生物样品消化掉，将复型膜（碳膜及其被碳膜包裹 的，含有图像信息的金属微粒膜）移到载网上，并在电镜（TEM）下进行观察。 * 为防止干燥时由于水界面急剧移动而使样品发生细微变形，在没有气体和液体界面的临界状态下除去样品中液体的方法。由Anderson创造的。把用Kleinschmidt法展开的样品装置在铺了支持膜的电镜观察用钢网上，通过脱水操作，最后用乙酰胺置换，放入临界点干燥装置（高压密闭容器）中，注入液态二氧化碳，在31℃、72.8个大气压的临界状态下干燥。 沉降系数（sedimentation coefficient）用离心法时，大分子沉降速度的量度，等于每单位离心场的速度。或s=v/ω2r。s是沉降系数，ω是离心转子的角速度（弧度/秒），r是到旋转中心的距离，v是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示，并且通常为1～200×10-13秒范围，10-13这个因子叫做沉降单位s，即1s=10-13秒，如血红蛋白的沉降系数约为4×10-13秒或4s。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在4s和40s之间，核糖体及其亚基在30s和80s之间，多核糖体在100s以上。 图片来源：/news.php?id=1175 * 图片来源：/Images/LifeSciences/1-10.1007_s00299-010-0869-x-4 Fig Nuclear Feulgen-staining of A. cepa root meristem cells following 72-h treatment with 0.75/0.50 mM HU. Bar 10 μm. a–h Cell nuclei with evident symptoms of premature chromosome condensation (PCC) at early (a) and late prophase (b), prometaphase (c), metaphase (d), anaphase (e), early (f) and late telophase (g), and post-telophase (h). i–n Intrachromosomal asynchrony in cells showing evident gradients of chromatin condensation: progressive condensation of chromatin observed during transitions from interphase to early prophase (i, j), from interphase-to-prophase/prometaphase (k, l), and from early prophase to prometaphase (m, n). Darkly stained chromocenters corresponding to telomeric heterochro