肿瘤的基因诊断.ppt

DD3 mRNA 13外显子扩增结果 M：50bp DNA Ladder；1：LNCaP阳性对照；2 ～ 3：PCa；4：PIN；5 ～ 6：BPH；7：直肠癌；8：直肠癌癌旁；9：结肠癌；10：结肠癌癌旁；11：乳腺癌；12：甲状腺癌；13：胃癌；14：胃癌癌旁；15：膀胱癌；16：软组织纤维肉瘤；17：转移性腺癌；18：淋巴结转移性黑色素瘤；19：卵巢成熟性畸胎瘤；20：正常肝脏；21：胆囊；22：胎盘；23：试剂空白。 肿瘤的基因诊断 肿瘤是细胞的异常增生 有结构、功能和代谢的异常 具有超过正常细胞增生能力 肿瘤概念 在细胞内核酸代谢的异常: 肿瘤细胞和正常细胞的核酸代谢有显著的不同； 不同类型肿瘤细胞的核酸代谢也有较大的差异； 相同恶性程度肿瘤细胞的核酸代谢也有所不同。 肿瘤是一种分子病 癌基因的激活 抑癌基因的失活（或缺失） 肿瘤发生机理 原癌基因 癌基因 病毒癌基因 肿瘤抑制基因 肿瘤转移相关基因 肿瘤耐药基因等 肿瘤相关基因 细胞基因组中具有能够使正常细胞发生恶性转化的基因 癌基因在正常细胞的基因组中 存在 不表达状态 表达水平不足以引起细胞的恶性转化 癌基因： 定位 功能 癌基因，产物 分泌蛋白 生长因子 sis PDGFβ链 跨膜蛋白 受体型酪氨酸激酶 erb B ,EGF受体 erb B2 ,EGF样受体 (neu) fms ,CSF-1受体 膜结合蛋白 G-蛋白 非受体型酪氨酸激酶 ras p21ras src pp60src 胞浆可溶性蛋白 非受体型酪氨酸激酶 丝氨酸/苏氨酸激酶 信号转导连接蛋白 ab1 raf crk,SH2/SH3调节蛋白 vav ,SH2调节蛋白 胞核蛋白 转录因子 myc myb fos jun erb A,T3受体 表1细胞癌基因按其产物定位和功能分类 能够抑制细胞恶性转化或抑制细胞异常 增殖的基因 目前研究较多的有p53基因、pRB基因、p16蛋白、p15蛋白、p21等。 抑癌基因 基因 染色体定位 相关肿瘤 基因产物及功能 RB 13q14 RB、成骨肉瘤、胃癌、SCLC、乳癌、结肠癌 p105，控制生长 WT 11p13 WT、横纹肌肉瘤、肺癌、膀胱癌、乳癌、肝母细胞瘤 WT-ZFP，负调控转录因子 NF-1 17p12 神经纤维瘤、嗜铬细胞瘤、雪旺氏细胞瘤、神经纤维肉瘤 GAP，拮抗p21rasB DCC 18q21.3 结肠瘤 P192, 细胞粘附分子 p53 17p13 星状细胞瘤、胶质母细胞瘤、结肠癌、乳癌、成骨肉瘤、SCLC、胃癌、磷状细胞肺癌 P53 控制肿瘤生长 erb A 17q21 ANLL T3受体，含锌指结构的转录因子 表2 已确定的几种抑癌基因 野生型P53生物学活性 当DNA损伤的时候,P53基因就明显表达使细胞在G1期生长阻滞，促使细胞凋亡。 抑制肿瘤细胞生长 保持DNA完整性 包括肿瘤转移促进基因或肿瘤转移抑制 基因。 肿瘤转移相关基因 其表达使肿瘤细胞对药物产生耐药的基因。 肿瘤耐药基因 血小板衍生生长因子（PDGF） 表皮生长因子（EGF） VGF基因等 肿瘤生长因子 肿瘤的基因诊断 肿瘤的基因诊断目前主要集中在以下几个方面： 肿瘤转移标志物 肿瘤抗药基因 突变的癌基因 肿瘤相关的病毒基因 标志分类 机制 分子标志 应用于癌症诊断 分子遗传性　 染色体易位 　 t(9；22)，t（14；18），t(11；12)等 白血病、淋巴瘤等 点突变　 p53,ER ras等　 胃癌、膀胱癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、胰腺癌、肺癌等 缺失 BRCA1，BRCA2，DCC等 乳腺癌、结肠癌 改变拼接 CD44，muc-1,VLA-4等 结肠癌、肾癌、乳腺癌、脑瘤等 扩增 erb-B2,EGFR,N-myc,ras 乳腺癌、脑瘤、神经母细胞瘤 比例改变 明胶酶A/TIMP2 乳腺癌转移等 病毒性 病毒转化 HPV,HCV,HBV，EBV 宫颈癌、肝癌、鼻咽癌等 组织性　 组织分化　 PSA,PSMA 前列腺癌 muc-18,酪氨酸酸酶，Mage-3 黑素瘤 AFP,白蛋白 肝癌 甲状腺球蛋白 甲状腺癌 NPGP9.5，酪氨酸羟化酶表面活性物质等 神经母细胞瘤 肿瘤性 肿瘤细胞特征 CEA 肺癌、结肠癌、胃癌、乳腺癌 β-HCG 黑素瘤等 CK-19 肺鳞癌 端粒酶 结肠癌、乳腺癌、头颈部癌等 微卫星体等 结肠癌、乳腺癌、头颈部癌等 表3? 肿瘤基因诊断的分子标