酶联免疫吸附试验在药残检测中的不足及解决方法.pdfVIP

动物食品安全 兽医导刊 2010年第9期 总第157期 酶联免疫吸附试验在药残检测中的 不足及解决方法 郭淑萍，徐周乔 （深圳市盐田区动物卫生监督所，广东深圳 518081） 食品安全问题已经成为全球关 相应的免疫反应，颜色反应的深浅 短运输时间，实验室保存试剂盒放 注的焦点问题之一。近年来 , 兽药 与标本中相应抗体或抗原的量呈正 在 4℃～ 8℃冰箱中存放，不可放在 残留致使食物中毒的报道屡见报端 , 比。此种显色反应可通过 ELISA 检 室内。使用前检查酶标板，将已干 严重损害了人们的健康，而且造成 测仪进行定量测定，这样就将酶化 孔丢弃；酶标抗原必须严格按照说 了意想不到的经济损失和巨大的政 学反应的敏感性和抗原抗体反应的 明书中酶标抗原的稀释倍数进行稀 治影响。传统的检测方法主要采用 特异性结合起来，使 ELISA 方法成 释并准确加样；酶标抗原失效可与 高压液相色谱（HPLC）、气相色谱 为一种既特异又敏感的检测方法。 供应商联系，进行更换；在接收试 一质谱法（GC － MS）等分析法检 剂时要验明有效期，如试剂盒有效 二、常出现问题的可能原 测兽药残留，需要昂贵的仪器设备 期太短，不能在有效期内用完则要 因及解决方法 和专业人员，费时、费力、成本高， 求供货商换货。 难以在基层推广。酶联免疫吸附试 目前酶联免疫法检测用试剂盒种 2. 显色结束整块板吸光度值都 验（ELISA）具有操作简便、灵敏度 类繁多，有国外进口的，有国内自 很高。出现这种情况有两方面原因， 高、样品容量大、仪器化程度和分 行研制生产的，如盐酸克仑特罗的 一是酶标抗原污染了盒内的其他试 析成本低的优点，已成为目前畜产 检测用试剂盒就有德国拜尔、美国 剂，二是未进行洗版操作，直接加 品药物残留检测中使用最普遍的方 IDS、英国朗道、北京望尔、杭州迪 显色剂。此种情况可以更换新批号 法之一，几乎所有重要的畜产品药 恩等。如何在众多的品牌中选择既 试剂盒，并严格按照说明书中的洗 残检测都已建立或试图建立 ELISA， 能满足检测要求又价格低廉的试剂 板操作步骤进行稀释。 如“瘦肉精”、莱克多巴胺、磺胺类、 盒是一个问题。在实际检测中可以 3. 标准曲线形态不好，吸光度 沙丁胺醇等。尽管酶联免疫吸附试 根据最低检测限、回收率、交叉反 值偏高。主要是酶标抗原的稀释倍 验有操作简便的优点，但在实践中 应率。标准曲线图谱及数据，进行 数偏低，反应温度过高。抗原稀释 很容易出现各种各样的问题，影响 选择。一般进口试剂盒性能稳定性 时必须按照说明书稀释倍数进行稀 因素较多，易出现假阳性结果等缺 比国内试剂盒好。但不管进口或者 释，反应温度在控制合理范围内。 点。现将常出现问题的可能原因和 国内试剂盒难免会造成假阴性或假 4. 标