ldlD-14细胞表达NCAM并控制其N-聚糖合成的细.PDF

962 生 物 工 程 学 报 何发 等/ldlD-14 细胞表达NCAM 并控制其N-聚糖合成的细胞模型的建立 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn June 25, 2014, 30(6): 962−971 DOI: 10.13345/j.cjb.130478 ©2014 Chin J Biotech, All rights reserved 生物技术与方法 ldlD-14 NCAM N- 1,2 1,2 1,2 2 1,2 何发 ，王欣 ，郭佳 ，李崎 ，关锋 1 214122 2 214122 , , , . ldlD-14 NCAM N-. , 2014, 30(6): 962−971. He F, Wang X, Guo J, et al. Expression of neural cell adhesion molecule and modification of its N-glycan in ldlD-14 cells. Chin J Biotech, 2014, 30(6): 962−971. 摘 要: 神经细胞黏附分子 (Neural cell adhesion molecule, NCAM) 是一类表达于神经元、胶质细胞、骨骼细 胞以及自然杀伤细胞表面的糖蛋白。NCAM 在细胞- 细胞黏附及神经细胞迁移等过程中起着重要作用，也是用 来研究多聚唾液酸(Polysialic acid, PSA)的模式蛋白。将来源于小鼠乳腺上皮细胞NMuMG 中的NCAM 基因克 隆到真核表达载体pcDNA3.1(+) ，转染至中国仓鼠卵巢细胞突变株ldlD-14 细胞中，通过抗生素G418 筛选及 蛋白质印迹法检测，得到过表达 NCAM 的永久转染细胞株。利用 ldlD-14 细胞的特性，通过在无血清的基本 培养基中添加半乳糖与否可以轻易操纵NCAM 分子上糖链的修饰，为后期研究糖基化对NCAM 分子功能的影 响提供工作基础。 : 糖链，神经细胞黏附分子，转染，多聚唾液酸，ldlD-14 细胞 Received: September 13, 2013; Accepted: February 10, 2014 Supported by: National Natural Science Foundation of China (No.. Corresponding author: Qi Li. Tel: +86-510 E-mail: liqi@ Feng Guan. Tel: +86-510 E-mail: fengguan@ (No. 2014-03-10 /kcms/doi/10.13345/j.cjb.130478.html 何发 等/ldlD-14 细胞表达NCAM 并控制其N-聚糖合成的细胞模型的建立 963 Expression of neural cell adhesion molecule and modification of its N-glycan in ldlD-14 cells 1,2 1,2 1,2 2 1,2 Fa He , Xin Wang , Jia Guo , Qi Li , and Feng Guan 1 Key Laboratory