课件：食品安全作业.ppt

* * 食品中沙门氏菌检验 GB 4789.4-2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 检验仪器和材料 1　冰箱：0℃～4℃。 2　恒温培养箱：36℃±1℃，42℃。 3　显微镜：10×～100×。　 4　高压灭菌器。 5 超净工作台。 6 均质器或灭菌乳钵。 7 架盘药物天平：0g～500g,精确度0.5g。 8 灭菌广口瓶：500mL。 9 灭菌锥形瓶：500mL、250mL。 10 灭菌吸管：10mL（具0.1 mL刻度）。 11 天菌培养皿：90mm。 12 灭菌小试管：内径3mm×50mm。 13 灭菌毛细管。 检验使用的培养基和试剂 1　缓冲蛋白胨水(BP) 2　氯化镁孔雀绿(MM)增菌液 3　四硫酸钠煌绿(TTB)增菌液 4　亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液 5　亚硫酸铋琼脂(BS) 6　DHL琼脂 7　HE琼脂：按GB/T 4789.28—2003中4.21规定。 8　TSI琼脂 9　蛋白胨水、靛基质试剂 10 尿素琼脂(pH7.2) 11 氨基酸脱羧酶试验培养基 12 沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。 检验沙门氏菌的样品 1 鲜猪肉、鲜牛肉；冻猪肉 2 鲜牛奶、鲜鱼；冻鱼 3 香肠、虾仁 沙门氏菌检验具体流程 检样 前增菌法 直接增菌法 冻肉、蛋品、乳品及其它加工食品 鲜肉、鲜蛋、鲜乳及其它未经加工的食品 25g ＋ BP 225mL 25g ＋灭菌生理盐水25mL 制成检样均质液 （36±1）℃ 一般 4 h，干蛋品 18～24 h 10mL＋MM(或TTB)100mL 10mL＋SC 100mL 检样均质液的半量＋MM(或TTB)100mL 检样均质液的半量＋SC 100mL 42℃ 18～24 h （36±1）℃ 18～24 h 42℃ 18～24 h （36±1）℃ 18～24 h BS DHL(或HE、WS、SS) （36±1）℃ 40～48 h （36±1）℃ 18～24 h 挑取可疑菌落 TSI（斜面、底层、产气、H2S）、蛋白胨水（靛基质）、尿素（pH7.2）、KCN、赖氨酸 H2S＋靛基质－ H2S＋靛基质＋ H2S－靛基质－ 非如左述的 尿素－KCN－赖氨酸＋ 尿素－KCN－赖氨酸＋ 尿素－KCN－赖氨酸＋/－ 各种反应结果 甘露醇、山梨醇　　　 　　 　ONPG 沙门氏菌血清学实验　　 沙门氏菌血清学实验　　 　非沙门氏菌　 　非沙门氏菌 报告 检验沙门氏菌操作步骤 1、前增菌和增菌 冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。以无菌操作取25g（mL），加在装有225mL缓冲蛋白胨水的500mL广口瓶内。固体食品可先应用均质器以8000～ 10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36℃±1℃培养4h (干蛋品培养18h～24h)，移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养18h～ 24h。同时，另取10mL，转种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36℃±1℃培养18h～24h。 鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。各取25g(25mL)加入灭菌生理盐水25mL，按前法做成检样匀液；取25mL，接种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫磺酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养24h；另取25mL接种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于