课件：钙、磷、镁和微量元素检验.ppt

* * * * * * * 第二节 钙、磷、镁和微量元素测定 ?一、钙的测定 血钙测定方法很多。 化学法 ①滴定法（氧化还原滴定，络合滴定）； ②比色法（邻甲酚酞络合法，甲基麝香 草酚蓝法）。 ? 物理法 ①火焰光度法；②ISE法；③原子吸收分 光光度法；④同位素稀释质谱法。 血钙测定 * 临床应用的方法：离子选择性电极法为主。 1．离子钙的测定 影响因素：标本pH值的改变，添加剂，标本类型。 迅速、简便、敏感性高，重复性好 【参考范围】1.10～1.34mmol/L * 2．总钙测定 方法：滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收 分光光度法、同位素稀释质谱法、酶法等 决定性方法：ID-MS 参考方法 ：原子吸收分光光度法 常规方法：邻甲酚酞络合酮法（o-CPC） o-CPC是一种金属络合染料，也是酸碱指示剂。在碱性条件下可与钙螯合生成紫红色螯合物，与同样处理的钙标准液比色，可求得血清钙的含量。 【参考范围】成人：2.03～2.54mmol/L，儿童：2.25～2.67mmol/L * 二、血清磷的测定 人体内的磷元素尚不能直接测定。在临床化学实验室进行的无机磷测定实际上只是直接分析磷酸盐阴离子（H2PO4-，HPO42-）。 决定性方法：ID-MS法 参考方法：AAS法 WHO推荐的常规方法：磷钼酸还原法 测定方法还有酶法等 * 1．磷钼酸还原法 2．磷钼酸非还原法 标本中的磷酸盐与钼酸生成无色的磷钼酸，用还原剂将磷钼酸还原成蓝色复合杂聚物钼蓝，620nm进行比色分析。临床实验室较多采用。 血清中无机磷在酸性溶液中与钼酸铵作用形成的磷钼酸铵杂聚化合物，在340nm或325nm波长的吸光度值与无机磷含量成正比，与标准品比较可计算出标本无机磷含量。适用于微量无机磷的测定。 3．酶法 嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）和黄嘌呤氧化酶（XOD）偶联并以过氧化物酶（POD）为指示剂的方法，可用于常规标本的自动分析 。 【参考范围】0.6～1.6mmol/L * 三、血清镁的测定 血清镁的测定包括总镁和离子镁 ①总镁的测定 比色法：甲基麝香草酚蓝比色法是推荐的常规测定方法 酶法 AAS法：参考方法 ID-MS法：决定性方法 ②离子镁测定 离子选择电极法 酶法 * 四、微量元素铁的测定 ID-MS法、中子活化法、AAS法、紫外分光光度法、荧光法、溶出伏安法等 铁的作用: 一是用于合成血红素进而合成血红蛋白。铁是血红蛋白的中心，而血红蛋白可结合氧并载运至各细胞以供吸收和代谢的需要。铁同时也是构成肌红蛋白的主要成分。 二是合成过氧化氢酶和过氧化物酶参与细胞氧化。 * 一般血浆中的运铁蛋白只有25%～30%被铁饱和。与未饱和的转铁蛋白全部结合所需的铁量称为未饱和铁结合力（UIBC） 血液中所有的运铁蛋白全部结合所需的铁量称为总铁结合力（TIBC） UIBC和TIBC： 铁饱和度 铁饱和度= ×100% 铁的分布： 血红蛋白：70% 肌红蛋白：5% 含铁卟啉辅基的酶：1% 贮存铁：24% 血浆（清）铁：0.1% ，主要以Fe3+形式与运 铁蛋白结合 总铁结合力 血清铁 * 血清铁的测定： 分光光度法是测定血清铁的主要方法。 首先使铁在酸性环境中与运铁蛋白分离，然后加入强还原剂使Fe3+还原成Fe2+。常用的还原剂有肼、抗坏血酸、盐酸羟铵、巯基乙酸等。铁被还原后，再用一种能与铁络合的显色剂络合Fe2+，进行比色测定。 【参考范围】 1.血清铁 男 11.6～31.3μmol/L 女 9.0～30.4μmol/L 2.血清总铁结合力 48.3～71.6μmol/L 3.铁饱和度 20%～55% 总铁结合力（TIBC）的测定： * 五、微量元素铜的测定 标本来源：血清、尿、头发、软组织等 测定方法： 1.原子吸收光光度法 2.血清铜比色法。 成年男性为11～22μmol/L 女性为12.6～24.4μmol/L 儿童为12.6～29.9μmol/L。 【参考范围】 生理作用：合成铜蓝蛋白、参与许多酶的组成 * 六、微量元素锌的测定 标本来源：血浆、尿、唾液和头发标本 测定方法： 1.原子吸收光光度法 2.分