课件：No.1~~衣原体的基因检测.ppt

第三节 衣原体的基因检测 题名：超高倍显微镜与安图生物检验试剂检测衣原体和支原体的分析 作者：黄位强 出处：《检验医学与临床》 2012年第17期 摘要：目的探讨超高倍镜在检测衣原体和支原体方面应用的准确度。了解健康人群的支原体和衣原体健康携带情况。方法对2011年4～11月到贺州市中医医院作妇科健康体检的512例妇女进行阴道分泌物超... 题名：支原体衣原体感染在不孕症中的影响 作者：张艳萍 出处：《中国医药科学》 2012年第14期 摘要：目的探讨支原体和衣原体感染在不孕症中的影响。方法选取2010年1月～2012年1月来笔者所在医院就诊的不孕症妇女36例作为观察组;另外选取同期的正常生育妇女36例作为对照组。支原体检验培… 题名：浅谈沙眼衣原体感染与母婴传播的关系 作者：韦新文 出处：《求医问药：下半月刊》 2012 摘要：目的探讨本地区泌尿生殖道感染患者支原体、衣原体感染状况。方法衣原体抗原检测采用单克隆抗体金标法;支原体检测采用液体培养法。结果 1226例标本中检出支原体453例,总阳性率为36.9%,其... 目录 衣原体（chlamydia）的定义 衣原体特点 衣原体结构 衣原体的分类 衣原体的发展 没有肽聚糖，小基因组； 能通过细胞滤器，有独特发育周期、 严格细胞内寄生的原核细胞型微生物 在自然界中传播广泛； 专性细胞内寄生，一般寄生在动物细胞内； 一 、衣原体（chlamydia）的定义 什么是衣原体 二、 衣原体特点 具有DNA和RNA两种核酸，二分裂增殖，有核糖体和黏肽组成的细胞壁； 衣原体基因组的Mr为660×10６,比除支原体外的任何原核生物都小； 其生活周期分为细胞外期（即有感染性的原体）和细胞内期（即增殖性的始体）两个时期； 原体（elementary body，EB）：有感染性，体积小，卵圆形，电子密度大，直径为0.2～0.4微米，细胞壁厚，一种不能运动的球状细胞，对外界不良环境抵抗力强。 始体（initial body）亦称网状体(reticulate body，RB)无感染性：球状细胞，形体较大,呈圆形或不规则形，电子密度较小，直径 约为0. 3 ～0. 5微米，细胞壁薄，壁中结构松散以二分裂进行繁殖，产生小细胞。 三、衣原体结构 中间体 (Intermediate body)：存在的一种过渡形态。 衣原体与细菌的主要区别： 缺乏合成生物能量来源的ATP酶，其能量完全依赖被感染的宿主细胞提供。 衣原体和其他微生物的区别 衣原体与病毒的主要区别： 具有DNA、RNA两种核酸、核糖体和一个近似细胞壁的膜，并以二分裂方式进行增殖，能被抗生素抑制。 四、衣原体分类 沙眼衣原体(C. trachomatis ) 肺炎衣原体(C. pneumoniae) 鹦鹉热衣原体(C. psitta ) 反刍动物衣原体(C.pecorum) 一、沙眼衣原体 不仅能引起眼科的感染性疾病，还可以引起泌尿生殖道、呼吸道感染等。其中以沙眼最常见。 而且是致盲的首位因素。人类是其主要的自然宿主。 ①：CT血清型D基因组长1042519bp，含有894个蛋白编码基因，G+C含量为41.3%，另一个是7493bp的隐蔽性质粒基因。 （一）.沙眼衣原体（CT）基因组结构 ②：根据CT的核酸组织具有真核样特性和为适应专性细胞内寄生所进行的复杂进化。 （二）诊断方法： 一：传统的实验室检测CT： ①：细胞培养法检测衣原体包涵体 （缺点：费时费事，成本高，技术难度高，难以普及） ②：血清学实验:如荧光抗体法或酶标抗体法 （缺点：越来越不能满足临床要求） 二：分子诊断方法 1：PCR PCR的特异性主要取决于引物的特异性。 PCR扩增所选靶序列主要有主要外膜蛋白（MOMP）、隐蔽性质粒和16SrRNA基因序列 2：LCR　（ligase chain reaction）连接酶链反应。其扩增效率与PCR相当，最大特点为可区分基因序列中的单个基因突变。由Landegree于1988年首次应用于镰刀形红细胞贫血的分子诊断。 什么是LCR？ 连接酶链反应（ligase chain reaction）：是继PCR后，新出现的一种更加完善的DNA体外扩增和检测技术，在检测点突变等方面具有独特的优点。该技术是利用DNA连接酶构建共价磷酸键，特异地连接双链DNA，经加热变性、退火和连接等步骤后，再多次反复循环，从而使目的DNA得以大量扩增。 LCR主要用途： 1：单碱基突变遗传病的检测 2：病原微生物种和亚种的检测 3：进行多位点同时定向诱变 二、肺炎衣原体 肺炎衣原体（CP）是衣原体属中的一个新种，只有一个