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课件:微生物-金黄色葡萄球菌.ppt
致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求 * * * * 金色葡萄球菌检验 食品安全检验技术(微生物部分) 闽北职业技术学院食品与生物工程系 一、生物学特性——菌体形态及培养特征 革兰氏阳性球菌,直径为0.5-1.0微米,镜检时呈单个、成对、四联或不规则的簇群,如葡萄状,故称为葡萄球菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 大多数菌株产生类胡罗卜素,使细胞团呈现出深橙色到浅黄色,色素的产生取决于生长的条件,故称金黄色葡萄球菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 大多数菌株最适生长温度30-37℃,最适pH为7.0-7.5; 兼性厌氧菌,在好氧条件下生长最好; 可在15%氯化钠和40%胆汁中生长。 一般用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤增菌或7.5%氯化钠肉汤增菌。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 所有的毒株产生血浆凝固酶,人和动物来源的菌株通常可凝固兔、人、马和猪的血浆。 金黄色葡萄球菌产生磷脂酶、蛋白酶、脂肪酶和溶菌酶等,大多数菌株可水解天然的动物蛋白并释放脂肪酸。在BP平板产生磷脂环。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 生物学特性 ——致 病 性 金黄色葡萄球菌为条件致病菌,菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶: a.溶血素:外毒素,能损伤血小板,破坏溶酶体,引起肌体局部缺血和坏死;在血平板培养出现溶血环。 b.杀白细胞素:可破坏人的白细胞和巨噬细胞; c.血浆凝固酶:当金黄色葡萄球菌侵入人体时,该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固,阻碍吞噬细胞的吞噬作用。 d.脱氧核糖核酸酶(DNA酶) e.肠毒素:引起急性胃肠炎。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌,临床表现多种多样,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、心包炎等,甚至败血症、脓毒症等全身感染。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 葡萄球菌皮肤感染 闽北职业技术学院食品与生物工程系 葡萄球菌性食物中毒是葡萄球菌肠毒素所引起的疾病,可引发不同程度的急性胃肠炎症状,恶心、呕吐最为突出而且普遍,腹痛、腹泻次之。 当金黄色葡萄球菌污染了含淀粉及水分较多的食品,如牛奶和奶制品、肉、蛋等,在温度条件适宜时,经8-10小时即可相当数量的肠毒素。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 二、检验程序与操作方法 根据中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准: 《食 品 卫 生 微 生 物 学 检 验》 GB 4789.10-94 金 黄 色 葡 萄 球 菌 检 验 闽北职业技术学院食品与生物工程系 检样 25g(ml)+225ml灭菌生理盐水 国标:金黄色葡萄球菌检验程序 直接计数方法 增菌培养方法 Baird-parker(贝尔德- 帕克) 0.3ml、0.3ml、0.4ml 7.5%氯化钠肉汤或 胰酪胨大豆肉汤 血平板 血平板 ,Baird-parker 涂片染色 观察溶血 血浆凝固酶试验 报 告 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 36± 1℃ 24hr 闽北职业技术学院食品与生物工程系 检验程序 ——增菌培养 利用金黄色葡萄球菌耐盐的特性(可耐受15%的氯化钠),用含10%氯化钠的胰酪胨大豆肉汤或7.5%氯化钠肉汤增菌。 置37摄氏度培养箱培养24小时。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 检验程序 ——分离培养 血平板:金黄色葡萄球菌可以产生溶血素,因此在血平板上产生明显的溶血环。 典型菌落:呈金黄色,有时也为白色,大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 大而突起,圆形,不透明,表面光滑,有溶血环 闽北职业技术学院食品与生物工程系 血平板制作 成分:豆粉琼脂(或营养琼脂)100mL,脱纤维羊血(或兔血)5-10mL。 制法:加热融化琼脂,冷至50℃,以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血,摇匀,倾注平板。或分装灭菌试管,摆成斜面。 BP(贝尔德- 帕克)平板: 胰蛋白胨、牛肉膏和酵母膏提供碳源、氮源、硫、维生素和矿物元素 丙酮酸钠是一种生长促进剂 亚碲酸盐对除金黄色葡萄球外的其他能分解卵黄的菌株有毒性,并使菌落产生黑色 卵黄提供营养和有利于观察卵磷脂环 甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用。 闽北职业技术学院食品与生物工程系 检验程序——分离培养 闽北职业技术学院食品与生物工程系 在BP平板上典型菌落为:灰色到黑玉色,圆形,光滑突起,湿润,直径2-3mm,边缘常为淡色(米黄色或灰色),周围
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