课件：实验肿瘤学网上.ppt

诱发肿瘤：用化学、物理、生物等因素在动物体内诱发的肿瘤。物理、生物因素诱发肿瘤的潜伏期长，发生率不稳定，常用化学因子诱发肿瘤。常用于肿瘤病因、化学预防的研究 诱发肿瘤模型的基本要求 简单易行、易重复 选择对特定致癌物敏感的动物种系： 多环方香烃-皮肤/小鼠； 甲基卞肼亚硝胺-食道癌/大鼠； 甲基氨基偶氮苯-肝癌/大鼠 恰当的致癌物剂量： 动物存活率高，诱发周期短。 诱发的肿瘤类似于人类肿瘤 原位诱发：如：0.25％二已基亚硝胺 0.25～1 ml 灌胃×6月， 70％发生肝癌 异位诱发：将与致癌物作用过的器官或组织移植于自体或同系、同基因正常动物皮下，诱发所需的肿瘤。如：甲基胆蒽穿线法穿入幼鼠子宫颈，将子宫颈切除，移植于同系成年小鼠皮下，3个月后诱发异位子宫颈癌 可移植性肿瘤 肿瘤组织在同种或异种动物体内传代后获得的生物学特性学相对稳定的肿瘤。 同种可移植性肿瘤 可分为实体瘤、腹水瘤、淋巴瘤、白血病 到1997年我国65株。 腹水瘤：将可移植性实体瘤接种于同种动物腹腔或腹壁，待肿瘤生长后形成腹水，再接接种于同系肿瘤。用于药物筛选。 异种可移植性瘤： 免疫力正常动物：免疫隔离区 如眼前房、脑内，或免疫抑制，如X线照射/可的松 免疫缺陷动物 移植部位 原位移植（orthotopic implantation） 异位移植(ectopic implantation) 皮下、肾包膜下、腹腔 可移植性肿瘤的参考标准 传15-20代以上 接种成活率100%，自发消消退率5% 生长速度稳定,宿主寿命稳定,宿主反应低下 瘤组织的组织结构与原发瘤相似，保持原发瘤的特性和标志 肿瘤转移的基本过程 原发灶 血管生成/降解细胞外基质 癌细胞入血/淋巴管 癌细胞穿过管壁 细胞增殖/休眠 再次转移 机理：“种子与土壤” 侵袭模型 背侧品皮下移植侵袭模型 肌肉内移植侵袭模型 腹腔内移植侵袭模型 肾包膜下移植侵袭模型 睾丸包膜下移植侵袭模型 爪垫皮下移植侵袭模型 小鼠尾部移植侵袭模型 耳廓皮下移植侵袭模型 癌细胞侵袭视网膜内界膜侵袭模型 转移模型 自发转移模型(spontaneous metastasis)：肿瘤细胞穿过宿主自然屏障，侵入血道和淋巴道而发生的转移，常用同种移植瘤和人肿瘤原位移植瘤，后者反映人肿瘤细胞与宿主器官的相互作用，可用于辅助治疗的研究 实验性转移模型(experimental metastasis)：人工方法将癌细胞移植于血道和淋巴道而发生的转移 SCID-Hu 鼠模型: 将人胚器官如肺、骨髓等移植于SCID 鼠皮下，建立癌细胞对靶器官的移植模型 血管生成研究模型 1.人肿瘤组织 肿瘤微血管密度iMVD 生长因子 2.移植瘤 3.血管内皮细胞系 4.Matrix Implant 5.CAM 血管生成有种属特异性 肿瘤休眠（tumor dormancy） 肿瘤细胞在机体内持续存在而又没有明显生长(2年)的状态,此时肿瘤细胞处于G0期或增殖和凋亡相平衡。 微小转移灶（micro-metastasis）:在原发灶以外用常规临床检查方法不能发现的肿瘤病灶 微小残留灶：治疗后在原发灶遗留的小量肿瘤细胞 转基因动物肿瘤模型 理论基础：1 肿瘤是癌基因突变/抑癌基因失活的结果 2 基因功能在进化中是保守的 转基因动物 外源基因在动物染色体稳定整合并遗传给后代的动物。 用途：生物医药 基因表达调控 单基因表达调控 多基因表达调控 基因敲除（knock out) 转基因方法 DNA 逆转录病毒/DNA转染 胚胎干细胞 显微注射 受精卵 四细胞胚胎 囊胚 原肠胚 转基因动物 显微注射