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课件:分子肿瘤概论上传.ppt
* * * * * 总之,基因在不同层次上单独调节,或通过相互间的调节来调控整个浸润、转移过程。 二.肿瘤学研究中常用的分子生物学基本技术及其应用 (一)基因扩增的检测 1.过量的蛋白表达 ---免疫组化(荧光)定位 ---ELISA和Western blot 定量 2.基因拷贝数的增加、转录产物mRNA的增加 ---- 核酸分子生物学方法进行检测 常用方法 (1)核酸分子杂交(nucleic acid molecular hybridisation)技术 最常用的基本技术 1.原位杂交 (ISH) 2.荧光原位杂交 (FISH), 3.双色(多色)银染原位杂交(DSISH) 3.Southern blot (DNA 杂交) 4.Northern blot (RNA 杂交) (2)聚合酶链反应(polymerase chain reaction , PCR)技术 又称体外基因扩增 扩增产物的检测 凝胶电泳分析 琼脂糖凝胶电泳 (最常用) 聚丙烯酰胺凝胶电泳 定量PCR Real-time PCR 原位PCR RT-PCR 3.基因芯片技术 (二)基因突变的检测方法 1.聚合酶链反应-单链构象多态性分析(Single strand conformation polymorphism analysis of polymerase chain reaction products , PCR-SSCP) 基本方法 2.PCR-限制性片段长度多态性(restrection fragment length polymorphisms , RFLP)分析技术 3.变性梯度凝胶电泳法(denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE) 4. DNA 序列分析(DNA sequencing ) 5. 荧光原位杂交 ( FISH) 6. DNA 芯片技术(DNA chip ) (三)肿瘤的微卫星不稳定性分析 微卫星不稳定性(microsatellite instability , MI), 是指简单重复序列的增加或丢失 检测方法 PCR + DNA 序列凝胶电泳 (四)肿瘤易感性检测 遗传癌症综合征与易感性 癌症综合征 易感基因 视网膜母细胞瘤 Rb1 Wilms 瘤 WT1 Li-Fraumeni 综合征 p53 家族性腺瘤性息肉(FAP) APC 遗传性非息肉性结肠癌(HNPCC) hMSH2, hMSH1 乳腺癌 BRCA1 卵巢癌 BRCA1 (五)肿瘤相关病毒 核酸杂交技术与PCR技术 (六) 基因重组技术 主要目的是获得某一基因或DNA片段的大 量拷贝 (七) 基因转染(gene transfection)技术 (八)RNA干涉(RNA interference)和微小RNA(micro RNA, miRNA) (九) 激光捕获显微切割技术(Laser capture microdissection,LCM) (十)共聚焦激光扫描显微镜技术(Confocal Laser Scanning Microscope,CLSM) 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营:网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意! 致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求 * * * * * * * * 分子肿瘤概论 一、肿瘤浸润、转移的分子机制 肿瘤浸润、转移的步骤 1.肿瘤细胞增殖 2.肿瘤血管生成(tumor angiogenesis) 3.肿瘤细胞分离脱落 4.肿瘤细胞迁移(migration) 5.与细胞外基质黏附,降解细胞外基质 6.瘤细胞以主动方式入循环管道并形成栓子 7.在特定器官的毛细血管滞
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